抗酸化物質としての母乳の役割

母乳作为抗氧化剂的作用

基本信息

批准号：
16790592
负责人：
東海林宏道
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Juntendo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790592/
关键词：
抗酸化作用母乳 heat shock protein スペルミン

项目摘要

【目的】Heat shock protein(HSP)は様々なストレスにより産生が誘導され、細胞を保護する機能を担っており、抗酸化作用を有するとされる。我々は過去の本学会において、母乳もしくは母乳中の生理活性物質の一つであるポリアミン(スペルミン:SPM)が消化管上皮において抗酸化作用を発揮していることを報告した。今回、母乳やSPMの持つ抗酸化作用の機序にHSPの誘導が関与しているとの仮説に基づき、消化管上皮細胞がHSPを産生し抗酸化作用を発揮するか、さらに母乳もしくはSPMによる前処理によって細胞内にHSPの一つであるHSP72が誘導されるか否かを培養細胞を用いて検討した。【方法】(実験1)ラット小腸上皮由来IEC-6細胞をconfluentまで培養後、day4にheat shock(43℃、60分)処理を施し、day5に0.25mMの過酸化水素を30分間作用させ、生存細胞の割合をneutral red uptake法により評価した。(実験2)day4にheat shock処理、もしくは無血清培地+母乳(100倍希釈除脂肪処理)及び5μM SPMで24時間前処理をしたIEC-6綱胞内のHSP72発現の有無をWestern Blot法にて検討した。【結果】(実験1)Heat shock処理を施したIEC-6細胞(69.0%)では無処理の対照(47.0%)に比べ過酸化水素負荷後の生存細胞が有意に多かった。(実験2)Heat shock処理をしたIEC-6細胞にHSP72の発現を認めたが、母乳または5μM SPMによる前処理では細胞内にHSP72の発現を認めなかった。【結語】Heat shockによりIEC-6細胞内にHSP72が誘導され、抗酸化作用を発揮することが示唆された。しかし、母乳やSPMが消化管上皮細胞においてHSP72を誘導するという事実は確認できなかった。

目的：热休克蛋白（HSP）由各种应力产生，据说具有抗氧化特性，并负责保护细胞的功能。我们在上一次会议上报告说，多胺（Apersine：SPM）是母乳或母乳中生理活性物质之一，在胃肠道上皮中施加抗氧化特性。基于以下假设：诱导HSP参与母乳和SPM的抗氧化作用机理，我们研究了胃肠道上皮细胞是否产生HSP并发挥HSP并发挥抗氧化作用，以及HSP72是否通过与母乳或SPM进行预处理在细胞中诱导HSPS之一。 [方法]（实验1）在将大鼠小肠上皮孵育至汇合后，第4天用热休克（43°C，60分钟）处理细胞，在第5天允许0.25 mm的过氧化氢处理30分钟，并通过中性红色摄取方法评估活性细胞的比例。（实验2）使用Western Blot方法研究了用热休克处理或无血清培养基 +母乳（100倍稀释脂肪脂肪处理）和5μMSPM处理的IEC-6囊泡中HSP72表达的存在或不存在。 [结果]（实验1）在用热休克（47.0％）处理的IEC-6细胞（69.0％）中，过氧化氢在过氧化氢（47.0％）中的生存细胞明显多于未经处理的对照（47.0％）。（实验2）在用热休克处理的IEC-6细胞中观察到Hsp72的表达，但用母乳或5μMSPM进行预处理显示细胞中HSP72的表达未表达。 [结论]热休克在IEC-6细胞中诱导HSP72，表明它具有抗氧化特性。但是，我们无法确认母乳和SPM在胃肠道上皮细胞中诱导HSP72的事实。