移植後早期の造血、免疫機構再構築を目指した造血幹細胞増幅の基盤技術の開発

造血干细胞扩增基础技术开发，旨在移植后早期造血和免疫系统重建

基本信息

批准号：
16790573
负责人：
平松英文
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

より鋭敏なヒト造血幹細胞移植モデルマウスを作製する目的で開発したNOD/SCID/g_c^<null>(NOG)マウスは、従来のNOD/SCIDマウスに比べて遥かに効率よくヒト造血細胞が生着する。臍帯血由来CD34陽性細胞10万個を移植すると3ヶ月後には骨髄、脾臓においてヒト血球は70%にも達した。また、このマウスに生着した細胞を詳細に検討してみると、骨髄球系、赤芽球系、巨核球系、リンパ球系のすべての血球が分化、増殖していることがわかった。特筆すべきこととしてこのマウスモデルではヒトT細胞、NK細胞が分化、増殖し、これらのリンパ球はサイトカイン産生能や細胞障害能を有するなど従来のマウスモデルでは全く見られなかった特徴を有していることを確認した。このマウスを用いることでヒト造血幹細胞移植に酷似した動物モデルを作製することが可能になった。臍帯血由来のヒト造血幹細胞分画としてCD34陽性細胞を分離し、Stem cell factor, IL-6, soluble IL-6 receptor, Flt-3 ligand, Thrombopoietinの存在下に1週間培養した。細胞数は60〜80倍に増え、コロニー形成数も10倍以上に達した。増幅した細胞をNOGマウスに移植し、4週後ないし8週後において解析すると顆粒球系のみならず、B細胞、T細胞など多系列に分化する細胞の生着を認めた。ヒト細胞の割合は現在までのところ有意な差を認めていないものの、我々の培養系が多分化能を保持したまま増殖を可能にしていることが示された。

NOD/SCID/G_C^<NULL>（NOG）小鼠开发的小鼠旨在产生更敏感的人造血干细胞移植模型小鼠，并且人类造血细胞比常规的NOD/SCID小鼠更有效地植入了人类造血细胞。在植入了源自脐带血的100,000个CD34阳性细胞后，三个月后的骨髓和脾脏的人类血细胞数量达到70％。此外，当我们检查了详细刻在该小鼠上的细胞时，发现髓细胞，红细胞，巨核细胞和淋巴细胞的所有血细胞都会区分和增殖。特别值得注意的是，在这种小鼠模型中，人类T细胞和NK细胞分化和增殖，并且这些淋巴细胞具有在常规小鼠模型中未发现的特征，例如具有细胞因子的产生和细胞毒性。使用这种小鼠，已经有可能创建与人类造血干细胞移植相似的动物模型。将CD34阳性细胞分离为源自脐带血的人造血干细胞馏分，并在干细胞因子的存在下培养，IL-6，可溶性IL-6受体，FLT-3配体和凝血酶素1周。细胞数量增加了60-80倍，菌落的数量达到了10倍以上。将扩增的细胞移植到NOG小鼠中，并在4到8周后进行分析，这不仅表明粒细胞系统不仅是粒细胞系统，而且还表明细胞的植入分为多个细胞，例如B细胞和T细胞。尽管迄今为止人类细胞的比例没有显着差异，但已表明我们的培养系统可以在保持其多能力的同时增殖。