ウナギ雌の性成熟過程を制御する性ステロイドホルモンの作用機構に関する研究

性类固醇激素控制雌性鳗鱼性成熟过程的作用机制研究

基本信息

批准号：
16780131
负责人：
東藤孝
金额：
$ 2.37万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

ウナギの人工種苗生産技術を確立するためには、先ず何よりも良質な卵や精子の安定した供給が不可欠である。そのためには、ウナギにおける性成熟の生理機構を理解し、その知見をもとにウナギの性成熟過程を人為的に統御する必要がある。そこで本研究では、魚類の性成熟の重要な制御因子である性ステロイドホルモンに着目し、ウナギ雌の性成熟過程における性ステロイド作用を分子レベルで明らかにすることを目的として、各性ステロイド(エストロゲン、アンドロゲン、プロゲスチン)の核内受容体(ER、AR、PR)や膜型受容体の構造と機能について解析した。本年度は、先ずウナギの2種サブタイプAR(ARαとARβ)および2種サブタイプPR(PRαとPRβ)のそれぞれのmRNA量を測定するためのリアルタイム定量PCR系を確立した。この測定系を用いて、ウナギ雌雄の生殖腺におけるARとPR mRNA量の性成熟過程に伴う変化を調べた。その結果、卵巣では成熟の進行とともにARとPRの双方とも増加したが、ARではARαが、PRではPRβがそれぞれ他のタイプよりも発現量が高い傾向を示した。一方、精巣ではARとPRの双方とも精子形成の進行とともに発現量が減少し、ARでは2種間で差は見られなかったが、PRではPRαがPRβよりも総じて高い発現量を示す傾向にあった。この様に、ARとPRともに雌雄の生殖腺や成熟のステージによりそれぞれのサブタイプで発現量に相違が見られたことから、ARとPRのサブタイプは卵巣や精巣の発達において異なる役割を担っていることが示唆された。さらにin situハイブリダイゼーション法による解析から、ARとPRのmRNAは卵巣では双方とも主に濾胞細胞や間質細胞で発現しており、精巣では生殖細胞を含めた様々な細胞で発現していることが初めて明らかとなった。

为了建立生产人造鳗鱼种子的技术，首先是稳定的高质量鸡蛋和精子的供应。为此，有必要了解鳗鱼中性成熟的生理机制，并根据其发现人为地控制鳗鱼的性成熟过程。因此，在这项研究中，我们专注于性类固醇激素，这些激素是鱼类性成熟的重要调节剂，并分析了核受体（ER，AR，AR，PR）和每个性类固醇，雌激素，雄激素，孕激素，孕激素）和膜受体的结构和功能，以阐明性摩尔型在性摩尔类药物层面上的作用。今年，我们首先建立了一个实时定量PCR系统，用于测量两个EEL亚型AR（ARα和ARβ）和两个EEL亚型PR（PRα和PRβ）的mRNA水平。使用此测量系统，我们研究了与性成熟相关的鳗鱼和雌性鳗鱼性腺中AR和PR mRNA量的变化。结果，随着卵巢的成熟进展，AR和PR都增加了，但是ARα在AR和PRβ中的表达水平往往具有较高的表达水平，往往比其他类型的PR具有更高的表达水平。另一方面，在睾丸中，随着精子发生的进展，AR和PR的表达水平都降低，尽管AR中这两种物种之间未观察到差异，但PR倾向于表现出比PRβ高的表达水平。以这种方式，在不同的亚型中观察到AR和PR的表达水平，具体取决于男性和女性亚型的性腺和成熟阶段，这表明AR和PR的亚型在卵巢和遗传的发展中起着不同的作用。此外，使用原位杂交方法的分析首次揭示了AR和PR mRNA在卵巢中主要在卵泡和基质细胞中表达，以及在包括生殖细胞在内的多种细胞中的睾丸中。