フラビウイルスの媒介節足動物種特異性に関する研究

黄病毒载体节肢动物物种特异性研究

基本信息

批准号：
04J09154
负责人：
好井健太朗
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J09154/
关键词：
フラビウイルスレプリコンパッケージングキメラ

项目摘要

フラビウイルスには多くの人畜共通感染症の原因ウイルスが含まれ、その多くは節足動物(ダニ、蚊)によって媒介される。ダニ/蚊媒介性のフラビウイルスは哺乳動物細胞では同様に感染し増殖するが、ダニ/蚊においては各々の媒介動物でしかウイルスは増殖せず、媒介動物特異的な感染・増殖様式の存在が示唆されるが詳細は明らかではない。ウイルスのゲノムより構造蛋白をコードする領域を欠損させたレプリコンは、細胞内において自己の複製は起こるが、構造蛋白が産生されないため、感染性のある粒子が放出されないため、ウイルスの複製機構の研究において有用な系として扱われている。そこでフラビウイルスの媒介動物特異的な増殖様式を解明するために、レプリコンを用いたダニ媒介性脳炎ウイルス(TBEV)および日本脳炎ウイルス(JEV:蚊媒介性)のキメラウイルス様粒子(キメラVLPs)を作成することを試みた。本研究において、ダニ媒介性フラビウイルスであるTBEVのレプリコンを北海道分離株Oshima株の感染性cDNAクローンを用いて構築し、また蚊媒介性のJEVの構造蛋白を発現するプラスミドをレプリコン導入細胞にトランスフェクトすることにより、JEV由来の粒子構造を持ちTBEVのレプリコンをゲノムとして持つキメラVLPsを分泌させた。キメラVLPsは一度のみの感染性を有しており、相補的に発現させた構造蛋白のmRNAとのrecombinationも起こしておらず、安全性にも優れていることが示された。また、キメラVLPsの節足動物由来培養細胞への感染性を検討することにより、フラビウイルスの媒介節足動物の特異性にはウイルスの侵入・増殖に関わる特異的な因子が関わっていることが示された。これらの成績はフラビウイルスの自然界における存続様式の解明に重要な知見をもたらし、今後のフラビウイルス感染症の疾病制御への展開が期待される。

黄病毒含有许多人畜共患病毒，其中大多数是由节肢动物（螨虫，蚊子）传播的。在哺乳动物细胞中类似地感染和增殖，但在螨虫/蚊子中，病毒仅在每个载体中生长，表明存在于载体特异性感染和增殖模式，但细节尚不清楚。从病毒基因组中编码结构蛋白的区域有缺陷区域的复制子将在细胞中复制自身，但是由于未产生结构蛋白，因此没有释放传染性颗粒，因此被认为可用于研究病毒复制机制。因此，为了阐明黄牛病毒的载体特异性增殖模式，我们试图创建tick传播脑炎病毒（TBEV）和日本脑炎病毒的嵌合病毒样颗粒（嵌合VLP）（JEV：JEV：JEV：MOSQUITO-BORNEE-BORNEE-BORNE-BORNEE-BORNEE-BORNE-BORNEE-BORNE）使用重复使用。 In this study, replicons of TBEV, a tick-mediated flavivirus, were constructed using an infectious cDNA clone of the Hokkaido isolate Oshima strain, and by transfecting a plasmid expressing the mosquito-borne JEV structural protein into cells introduced into replicons, chimeric VLPs with JEV-derived particle structures and TBEV replicons as genomes.嵌合VLP仅具有一次感染性，并且没有与互补表达的结构蛋白的mRNA重组，并且已被证明是高度安全的。此外，通过检查嵌合VLP对培养的节肢动物细胞的感染性，证明了黄病毒介导的节肢动物的特异性涉及参与病毒进入和增殖的特定因素。这些结果为阐明黄病毒的自然生存模式提供了重要的见解，预计将来将开发出黄酮病毒感染的疾病控制。