真皮層由来性血管幹細胞の同定及び幹細胞ニッチの解析-再生医療に向けて

真皮层来源的成血管细胞的鉴定和干细胞生态位的分析 - 走向再生医学

• 批准号: 04J02528
• 负责人: 佐野 秀人
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Osaka University (2006)Kanazawa University (2004-2005)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J02528/
• 关键词: 血管; 幹細胞; 皮膚; 内皮細胞; 平滑筋細胞; 毛; 平滑筋細

幹細胞についての研究は、骨髄における造血幹細胞を中心に行われてきたが、近年、種々の臓器に臓器特異的な組織幹細胞が存在することが明らかになってきた。我々は血管の幹細胞が皮膚組織中に存在し、組織修復などにおいて重要な役割を果たしていると仮定し、この血管幹細胞を単離し表現型の解析を行った。まず、研究代表者が注目したのが幹細胞マーカーとして一般的に用いられているSca-1(Stem cell antigen-1)である。皮膚組織の細胞中でSca-1を発現している細胞をセルソーターで回収し、これを内皮細胞増殖用の培地中で培養したところ、内皮様および平滑筋様細胞の両者が発生することから、本Sca-1陽性細胞中に血管幹細胞が存在することが示唆された。そこで、これら血管幹細胞の発生、維持機構について詳細にするため、組織幹細胞の維持機構および分化機構における種々の転写因子の機能解析を行っている米国Vanderbilt大学の久米努先生との共同研究奇開始し、さらなる検討を行った。久米グループが着目している転写因子Foxcは皮膚でも発現を確認しており、またFoxcは血管系への分化を制御している可能性もある。そこで、皮膚の血管幹細胞の分化段階においてFoxcの発現を解析するため、Foxcプロモーター制御下で蛍光マーカーを発現するトランスジェニックマウスの作成に着手した。Foxcのような転写因子群は、一般的な遺伝子プロモーターとは異なり、エンハンサーやデハンサー配列が本遺伝子の遠位に存在する可能性を考慮し、BAC(Bacterial Artificial Chromosome)を用いた蛍光マーカートランスジェニックマウス(セミノックインマウス)の作成に着手した。本研究期間において、本トランスジェニックマウス作成用の遺伝子コンストラクトを終了した。

对干细胞的研究一直集中在骨髓中的造血干细胞上，但近年来已经表明，各种器官中存在器官特异性组织干细胞。我们假设血管干细胞存在于皮肤组织中，并在组织修复等中起重要作用，并隔离了这些血管干细胞并分析了其表型。首先，研究人员专注于SCA-1（干细胞抗原1），该研究人员通常用作干细胞标记。使用细胞分散者收集在皮肤组织中表达SCA-1的细胞，并在培养基中培养以进行内皮细胞生长，并产生内皮样细胞和平滑肌样细胞，表明SCA-1阳性细胞中存在血管干细胞。因此，为了提供有关这些血管干细胞的开发和维护机制的更详细信息，我们与美国范德比尔特大学的Kume Tsutomu教授开始了一个联合研究项目，后者分析了各种转录因子在组织干细胞的维持和分化机制中的功能，并进行了进一步研究。转录因子FOXC是Kume组的重点，也已被证实在皮肤中表达，FOXC也可能控制分化为血管系统。因此，为了分析皮肤血管干细胞分化阶段的FOXC表达，我们开始创建一种转基因小鼠，该小鼠在FOXC启动子的控制下表达荧光标记。与一般基因启动子不同，诸如FOXC之类的转录因子与共同基因启动子有所区别，并考虑到可能存在于基因远端的增强子和降低序列的可能性，我们已经开始使用BAC（细菌性人造染色体）创建荧光标记转基因小鼠（Seminococ-cocin）。在本研究期间，完成了该转基因小鼠的基因构建体。

项目成果

Cyclic AMP potentiates vascular endothelial cadherin-mediated cell-cell contact to enhance endothelial barrier function through an epac-rap1 signaling pathway

• DOI: 10.1128/mcb.25.1.136-146.2005
• 发表时间: 2005-01-01
• 期刊: MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY
• 影响因子: 5.3
• 作者: Fukuhara, S;Sakurai, A;Mochizuki, N
• 通讯作者: Mochizuki, N

Roles of thromboxane A(2) and prostacyclin in the development of atherosclerosis in apoE-deficient mice.

• DOI: 10.1172/jci21446
• 发表时间: 2004
• 期刊: The Journal of clinical investigation
• 作者: Takuya Kobayashi;Y. Tahara;Mayumi Matsumoto;M. Iguchi;H. Sano;T. Murayama;H. Arai;H. Oida

Expression of the novel Snai-related zinc-finger transcription factor gene Smuc during mouse development.

• DOI: 10.3892/ijmm.15.6.945
• 发表时间: 2005-06
• 期刊: International journal of molecular medicine
• 影响因子: 5.4
• 作者: Xin Zhuge;H. Kataoka;Makoto Tanaka;T. Murayama;T. Kawamoto;H. Sano;Kiyonori Togi;R. Yamauchi;Y. Ueda;Yang Xu;S. Nishikawa;T. Kita;M. Yokode

Hematopoietic cells regulate the angiogenic switch during tumorigenesis.

造血细胞在肿瘤发生过程中调节血管生成开关。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Blood 105
• 作者: Okamoto R;Ueno M;Yamada Y;Takahashi N;Sano H,;Takakura N.
• 通讯作者: Takakura N.