プロモーターは転写後にRNAが識別される過程にどのように関わっているのか

启动子如何参与转录后 RNA 的识别过程？

• 批准号: 04J01234
• 负责人: 福家 浩之
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J01234/
• 关键词: RNA; 核・細胞質間輸送; 転写反応; プロモーター; 3'末端形成反応; アフリカツメガエル卵母細胞; polyadenylation; RNA核外輸送経路; UsnRNA; mRNA; RNAポリメラーゼ; RT-PCR

前年度に引き続いて、RNAの3'末端形成反応によってそのRNAの核外輸送が受ける影響を明らかにするために研究を行ってきた。その結果、3'末端にpoly(A)の付加を受けたRNAは、その他にmRNAとしての特徴を持たない場合でも、mRNA型の核外輸送を示すことが確かめられた。次に、この現象の分子メカニズムを明らかにするための実験を行った。分子メカニズムとしては、(1)poly(A)の長さがRNAの長さに寄与し、mRNAとして認識されることにつながっている(2)poly(A)付加の際に、mRNAを特徴づけるタンパク質因子がRNAと結合する(3)poly(A)は、その長さに関わらず、mRNAの特徴として認識されるなどの可能性が考えられる。種々の実験の結果、(3)の可能性を否定することを示す結果が得られたが、現在利用している実験系では、さらなる分子メカニズムの完全な解明を行うのは困難であると思われた。現在、poly(A)付加を受けたRNAに結合するタンパク質因子を同定するために、免疫沈降実験を行っている。この実験により、分子メカニズムの概要を明らかにすることができると期待される。免疫沈降実験の結果を得られた後は、可及的速やかに国際雑誌に投稿する予定である。

继去年之后，我们进行了研究以明确RNA 3'末端形成反应对RNA核输出的影响。结果证实，3'末端添加有poly(A)的RNA即使不具有其他mRNA特征，也表现出mRNA型核输出。接下来，我们进行了实验来阐明这一现象背后的分子机制。分子机制是：(1) Poly(A) 的长度影响 RNA 的长度，导致其被识别为 mRNA (2) 在添加 Poly(A) 后表征 mRNA Poly(A) 可能是将蛋白质因子与 RNA 结合 (3)，被认为是 mRNA 的特征，无论其长度如何。经过各种实验，我们得到了否定(3)的可能性的结果，但我们认为用目前使用的实验系统很难进一步完全阐明分子机制，对此我感到失望。目前，我们正在进行免疫沉淀实验来鉴定与添加了 Poly(A) 的 RNA 结合的蛋白质因子。该实验有望揭示分子机制。获得免疫沉淀实验结果后，我们计划尽快将其提交给国际期刊。