新生児monocyteにおけるIL-1ra発現の特異性に関する検討

新生儿单核细胞IL-1ra表达特异性的检查

• 批准号: 15791021
• 负责人: 内田 恵一
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15791021/
• 关键词: 新生児; サイトカイン; IL-1ra; 好中球; 単球; 外科侵襲

サイトカイン産生能の検討のため、正常分娩児15例の臍帯血と健常成人15例の末梢血よりStepSepによるnegative selectionで単球と好中球を分離、LPSもしくはIL-1βを添加し培養後(3hr、6hr、24hr)、上清のIL-1ra濃度を測定した。また、好中球については細胞よりmRNAを抽出しRT-PCRを行ってIL-1raの遺伝子発現をPhosphorImagerを用い半定量で比較検討した。その結果、培養においては、単球ではLPSとIL-1βのいずれの刺激に対しても3hr後、6hr後、24hr後の上清中IL-1ra濃度に臍帯血と成人で差は認められなかったが、好中球ではLPS添加で3hr後295.3±124.6vs.190.2±96.7(p=0.03)、6hr後462.8±184.8vs.307.7±176.7(p=0.04)、24hr後725.7±313.6vs.489.4±338.0(p=0.04)、IL-1β添加で3hr後316.7±168.3vs.198.0±142.5(p=0.03)、6hr後455.1±173.1vs.304.5±143.1(p=0.03)、24hr後675.2±272.4vs.437.1±287.4(p=0.01)と臍帯血のIL-1ra濃度が有意に高値だった。また、好中球のRT-PCRにおいても臍帯血においてIL-1raの発現が有意に成人よりも高値であった(p=0.04)。以上の結果から今回の腫大であった単球においてはIL-1ra産生能に差は認められなかったが、好中球からのIL-1ra産生が新生児において亢進しており、これまでの実験で得られた母体からのIL-1raの移行と合わせ新生児ではか弱い体を守るために生直後からIL-1raが高値に保たれている可能性が示唆された。

为了研究细胞因子的产生能力，将单核细胞和中性粒细胞与15个正常分娩和15个健康成年人的外周血分离，并通过使用STEPSEP，LPS或LPS或IL-1β进行阴性选择，并在孵育后（3小时，6小时，24小时，24小时），IL-1RA浓度在超级净化剂中。此外，对于中性粒细胞，从细胞中提取mRNA，进行了RT-PCR，并比较了IL-1RA的基因表达，并使用磷光受像剂进行半量表性研究。结果，在培养中，单核细胞中LPS和24小时后，在3小时，6小时和24小时后，脐带血和成年人在上清液中没有差异，但是在中性粒细胞中，LPS在3小时，3小时，295.3±124.6 vs.190.2.2±96.2 hr后添加LPS，均为295.3±124.6 vs。 184.8 vs. 307.7±176.7（p = 0.04），在7后24小时，索索血液中的IL-1RA浓度明显更高，25.7±313.6vs.489.4±338.0（p = 0.04），添加IL-1β，316.7±168.3vs.198.3vs.198.1988.0.0.0.198.1988.0.0 or off。 655.1±173.1vs.304.5±143.1（p = 0.03）和675.2±272.4vs.437.1±287.4（p = 0.01）添加IL-1β后。此外，脐带血中的IL-1RA表达显着高于中性粒细胞RT-PCR（p = 0.04）。上述结果表明，单核细胞中IL-1RA的产生能力没有差异，这具有当前的增大，但中性粒细胞中嗜中性粒细胞的IL-1RA产生增加，这表明可以在出生后立即将IL-1RA水平保持在高水平，以便保护中性粒细胞中的弱体。