網羅的遺伝子発現解析によるsjogren症候群の病態解明

通过综合基因表达分析阐明干燥综合征的病理学

基本信息

批准号：
15791001
负责人：
川崎諭
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Kyoto Prefectural University of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

Sjogren症候群患者と正常者より結膜上皮細胞をブラシサイトロジーにて採取してtotal RNAを抽出した。これをiAFLP法にて結膜上皮細胞に優位に発現している遺伝子および炎症性皮膚疾患である乾癬で発現が亢進している931遺伝子について遺伝子発現解析を行った。うち妥当なデータの得られた遺伝子は578遺伝子であった。データをクラスター解析にて解析したところ、サンプルは大きく2つのグループに分かれた。片方はSjogren症候群だけからなるグループで、もう一方はSjogren症候群4例と正常者のすべてを含むグループであった。このクラスター分けに寄与した遺伝子を調べたところSjogren症候群で発現が亢進している遺伝子群と、逆にSjogren症候群で発現が減少している遺伝子群であった。Sjogren症候群で最も発現が充進していたのはKL : K7という皮膚ケラチノサイトの終末分化に関与する遺伝子であった。また最も発現が減少していたのはIFN-gamma受容体であった。Sojogren症候群と正常者の遺伝子発現の比較によって、Sjogren症候群の結膜上皮細胞は炎症性サイトカイン等の刺激によって細胞増殖と角化亢進状態にあることが示唆された。Sjogren症候群の結膜上皮が細胞増殖亢進と角化亢進状態にあるかどうかを調べるために、sjogren症候群患者の結膜組織に対して角化関連タンパクであるTransglutaminaselとinvolucrinおよび細胞増殖関連タンパクであるKi67に対する抗体で免疫染色を行った。結果としてSjogren症候群の結膜上皮ではTransglutaminaselとinvolucrinの発現が亢進していることが確認された。またKi67陽性細胞はSjogren症候群の結膜上皮細胞で約2倍となっており、細胞増殖亢進状態であることが確認された。

使用刷子细胞学来提取总RNA，从患有Sjogren综合征的患者和正常个体的患者中收集结膜上皮细胞。使用IAFLP方法分析了这一基因，这些基因主要在结膜上皮细胞和931个基因中以牛皮癣的增加，是炎症性皮肤病。其中，获得合理数据的基因为578个基因。当使用群集分析分析数据时，将样品分为两组。一个是仅由Sjogren综合征组成的组，另一组是一个包含所有四例Sjogren综合征和正常个体的群体。当我们研究了促成这种聚类的基因时，我们发现在Sjogren综合征中表达增加的基因和Sjogren综合征表达降低的基因。 Sjogren综合征最丰富的表达是一种称为KL：K7的基因，它参与了皮肤角质形成细胞的末端分化。 IFN-GAMMA受体也是表达最少的。寄居综合征与正常个体之间基因表达的比较表明，Sjogren综合征的结膜上皮细胞通过刺激炎性细胞因子等而处于细胞增殖和高乳变性状态。为了研究Sjogren综合征的结膜上皮是否处于高细胞和过度性过度的状态，用抗角质素相关的蛋白质经谷氨酸和综合蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质蛋白蛋白质蛋白质蛋白ki67抗体对患有Sjogren综合征患者的结膜组织进行了结膜组织。结果，已经证实，在Sjogren综合征的结膜上皮中，经谷氨酰胺和易依性的表达增加。此外，Ki67阳性细胞在Sjogren综合征的结膜上皮细胞中的两倍，并被证实处于细胞增殖状态的增加。