アポリポタンパク(a)遺伝子の転写調節機構の解明

阐明载脂蛋白(a)基因的转录调控机制

• 批准号: 15790462
• 负责人: 鈴木 浩明
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790462/
• 关键词: リポタンパク(a); インスリン; HNF-1β; PI3 kinase; アポリポタンパク(a)

リポタンパク(a)[Lp(a)]は動脈硬化の独立した危険因子で、その血中濃度の90%は遺伝的に規制されている。しかし、炎症性疾患などでは血清Lp(a)濃度は大きく変化することが知られている。我々は、apo(a)合成の転写レベルでの調節を明らかとするためにreporter gene assayを行った。昨年までに、インスリンまたはEGF,IGF-1,IGF-β,TNF-α添加によりapo(a)遺伝子プロモーター活性は非投与時に比べて低下することを明らかとした。今回、インスリンがapo(a)遺伝子プロモーター活性を低下させる機序について検討した。apo(a)遺伝子プロモーター上に存在すると想定される、HNF-1β,HNF-4の発現ベクターおよびインスリン・シグナルに関与するとされるPI3 kinase,Akt,PKCλの恒常活性化型発現ベクターを作製し、HepG2細胞またはマウス初代培養肝細胞にapo(a)プロモーターをレポーター遺伝子に結合したプラスミドとともにco-transfectionした。100nMインスリン添加により、apo(a)のプロモーター活性は20%減少した。インスリン非添加時には、HNF-1βはapo(a)プロモーター活性を約3倍増加させ、インスリン添加により約4倍に増加させた。一方、PI3 kinaseおよびAkt,PKCλは、apo(a)プロモーター活性を30%低下させた。また、HNF-4はapo(a)のプロモーター活性に影響を与えなかった。以上から、インスリンは、HNF-1を介して正に、apo(a)プロモーター上の未知の転写因子を介して負に制御しており、全体としては負に制御すると考えられた

脂蛋白（A）[LP（A）]是动脉粥样硬化的独立危险因素，其血液浓度的90％受到遗传调节。然而，众所周知，血清LP（A）浓度在炎症性疾病等方面差异很大。我们进行了记者基因测定法，以揭示APO（a）合成的转录水平的调节。到去年，与未施用相比，添加了胰岛素或EGF，IGF-1，IGF-β和TNF-α的添加可降低APO（A）基因启动子活性。在这里，我们研究了胰岛素降低APO（A）基因启动子活性的机制。 HNF-1β，HNF-4表达载体和PI3激酶（AKT和PKCλ）的组成型激活的表达载体，据信被认为存在于APO（A）基因启动子上，并在HEPG2细胞或原代小鼠Hepatocytes中共同转发，并与APO启动（APO）共同转发。添加100 nm胰岛素可将APO（a）的启动子活性降低20％。当未添加胰岛素时，HNF-1β提高了APO（A）启动子活性大约三倍，并通过胰岛素增加了大约四倍。同时，PI3激酶（AKT，PKCλ）将APO（A）启动子活性降低了30％。此外，HNF-4不影响apo（a）的启动子活性。从上面可以看出，胰岛素是通过HNF-1积极控制的，并通过APO（a）启动子上未知的转录因子进行负面控制，通常被认为是负面控制的。