神経ペプチドを用いた難治性自己免疫性眼疾患再発抑制の試み

尝试使用神经肽抑制难治性自身免疫性眼病的复发

基本信息

批准号：
03J09657
负责人：
北市伸義
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

[目的]これまでの我々の研究により、マウス実験的ぶどう膜炎回復後脾臓内に抗原特異的免疫制御性T細胞が誘導され、この細胞集団を同系マウスに養子移入すると実験的ぶどう膜炎を抑制できる。本年度の研究目的はこの制御性T細胞の誘導・活性化機序をもちいた「同種異系網膜移植拒絶反応の制御」である。[実験方法と結果]研究計画書に記載した通り、実験的ぶどう膜炎を起こさずにぶどう膜炎特異的制御性T細胞(Treg)を誘導する方法を確立し、それを同種異系網膜移植拒絶反応抑制に応用した。手術顕微鏡下でGFP蛍光トランスジェニックマウス(H-2^b)から網膜組織片を摘出し、異系マウスであるB10RIII(H-2^r)硝子体内に注入した。半数のマウスにはB10.RIII由来のTregを上述のプロトコールに従って誘導し、養子移入した。残りの半数はTregを養子移入せずに対照群とし、実際に網膜視細胞が生存しているかを視細胞蛋白(リカバリン)抗体で免疫染色することにより、また、免疫細胞の浸潤の有無をGSレクチンとCD3抗体免疫染色により観察・評価した。→対照群は2週間後には75%のマウスで網膜移植片が完全に拒絶、吸収された。→一方Treg移入群は全例で移植片が生存し、移植片サイズも有意に大きかった。→Treg移入群は網膜視細胞が多数生存していたが、対照群では視細胞はほとんど拒絶・死滅していた。→免疫細胞は両群ともにみられた。[まとめと考察]同種異系移植片内に免疫細胞が浸潤していたにもかかわらず、網膜組織片も網膜視細胞も長期間生着・生存した。本免疫機構を用いることにより、単に同種異系網膜移植片が大きいだけでなく、網膜視細胞を「生存」させることが出来る。さらに、本機構は眼のみならず他の臓器移植分野でも有用である可能性がある。(753字)

目的：我们以前的研究表明，在小鼠中恢复实验性葡萄膜炎后，脾脏诱导抗原特异性的免疫调节细胞，当该细胞群被采用到同性小鼠中时，可以抑制实验性葡萄膜炎。今年研究的目的是“控制同种异性视网膜移植抑制”，该抑制具有诱导和激活该调节性T细胞的机制。 [实验方法和结果]如研究计划中所述，建立了一种方法来诱导葡萄膜炎特异性的调节性T细胞（TREG）而不会引起实验性葡萄膜炎，并应用于抑制同种异性视网膜移植物排斥。在手术显微镜下从GFP荧光转基因小鼠（H-2^B）中取出视网膜组织片段，并注入异源小鼠B10RIII（H-2^R）。根据上述方案并采用了一半的B10小鼠。其余的一半被用作对照组无生育转移，并且通过使用光感受器蛋白（恢复蛋白）抗体进行免疫染色实际上，视网膜光感受器细胞实际上是活着的，并且使用GS乳腺蛋白和CD3抗体免疫染色，观察到了或不存在免疫细胞浸润和不存在。 →2周后，完全拒绝并吸收了75％的小鼠。 →另一方面，在Treg转移组中，移植物在所有情况下都存活，移植物的大小明显更大。 →许多视网膜感光细胞在Treg转移组中存活，但大多数感光细胞在对照组中被拒绝并杀死。 →两组中都可以看到免疫细胞。 [摘要和讨论]尽管同种异体移植物中免疫细胞的侵袭，但视网膜组织和视网膜感受器细胞都植入并存活了很长一段时间。通过使用这种免疫机制，不仅同种异性视网膜移植物很大，而且还可以“存活”视网膜感光细胞。此外，该组织不仅在眼睛，而且在其他器官移植场中也可能有用。（753个字符）