単純ヘルペスウイルスUL56遺伝子産物の機能解析

单纯疱疹病毒UL56基因产物的功能分析

• 批准号: 03J00847
• 负责人: 腰塚 哲朗
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J00847/
• 关键词: HSV; 小胞輸送; envelopment; vesicle transport

単純ヘルペスウイルス(HSV)のコードするUL56遺伝子産物は、C末端アンカー型膜タンパク質である。UL56はゴルジ体、Early endosomeなどの脂質膜構造に局在し、その一部はラフト上に存在していることを明らかにしてきた。本研究はUL56タンパク質と相互作用するパートナーを同定し、UL56の機能を予測・解析することを目的とした。本研究により、宿主側因子のKIF1A、ウイルス側因子のUL11がUL56のパートナーであることが明らかとなった。KIF1Aは神経細胞特異的に発現しているKinesinの一つであり、C末端部分に脂質と相互作用するPH domainを持ち、presynaptic vesicleの輸送に関わっていることが報告されている。Yeast two-hybrid法、GST-pulldown法、蛍光抗体法を用い、KIF1AがUL56と相互作用していることを示した。UL56は神経細胞内においてKIF1Aのレセプターとして細胞質小胞上に存在し、ウイルス糖タンパク質などの軸索内輸送に関わっている可能性が示唆された。この結果は2005年5月号のJ.Gen.Virol.に掲載予定である。UL11遺伝子はヘルペスウイルスに保存されている遺伝子である。UL11はN末端部分においてミリスチン酸化、パルミチン酸化を受ける膜タンパク質である。HSVにおいてUL11はHSVのエンベロープ獲得に重要であり、この欠損は粒子形成を著しく減弱することが報告されている。GST-pulldown法、免疫沈降法、蛍光抗体法を用い、UL56とUL11がタンパク質複合体を形成していることを明らかにした。この複合体形成にはUL11のN末端部分が必要であり、特に脂質付加が重要であることが分かった。UL56の欠損はHSVの増殖に大きな影響を与えないが、以上の結果からUL56がHSVの粒子形成、特にエンベロープ獲得に重要な働きを担っている可能性が示唆された。この結果は現在論文投稿準備中である。

由简单疱疹病毒（HSV）编码的UL56基因产物是C末端锚固型膜蛋白。 UL56位于脂质膜结构中，例如高尔基体，早期内体，并揭示了其中一些在木筏上。这项研究旨在确定与UL56蛋白一起起作用的伴侣，并预测和分析UL56的功能。这项研究表明，宿主的KIF1A和病毒因子UL11是UL56伴侣。据报道，KIF1A是表达神经细胞的动力蛋白之一，具有与C末端上脂质相互作用的pH结构域，并且参与了突触前囊泡的运输。使用酵母双杂交法，GST-Pulldown方法和荧光抗体方法，KIF1A与UL56相互作用。有人提出，UL56在细胞质血管上存在作为神经细胞内的KIF1A受体，并且可能参与轴上转运（例如病毒 - 糖蛋白）。结果将在2005年5月的J.Gen.Virol中发布。 UL11基因是存储在疱疹病毒中的基因。 UL11是一种膜蛋白，在N端部分接收米碱氧化和棕榈蛋白氧化。在HSV中，UL11对于获得HSV信封很重要，据报道，这种缺陷会显着降低颗粒的形成。使用GST-Pulldown方法，免疫沉积法和荧光抗体方法，据表明UL56和UL11形成了蛋白质复合物。这种复合物的形成需要UL11的UL1末端部分，事实证明，脂质的添加尤其重要。 UL56缺陷对HSV的生长没有显着影响，这表明UL56可能是HSV颗粒形成的原因，尤其是信封的获取。目前，该结果正在准备发布论文。