遺伝子組み替えによる加齢性難聴モデルマウスの形態学的および電気生理学的解析

转基因年龄相关性听力损失模型小鼠的形态学和电生理分析

• 批准号: 14770888
• 负责人: 戸叶 尚史
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770888/
• 关键词: マウス; DPOAE; ABR; 脳定位固定装置; 探触子; 歪成分耳音響放射; 聴性脳幹反射; C57BL; 6J; Six1; Otx1; Lfng; Fgf3; Bmp4; 6; 129; SvJ; 遺伝子; PCR法; マイクロサテライト; 加齢性難聴; 難聴修飾遺伝子

分子生物学の領域では疾患モデル動物としてマウスが広く用いられているが,その聴覚域値の測定に関してはABRを使用することが一般的であった.一方,DPOAEは外有毛細胞の機能を鋭敏に反映する優れた検査方法であるが,マウスの外耳道は狭く,至適周波数が高いためDPOAEの測定は困難であった.我々はMimosa acoustic社のDP-2000が24kHzまでのDPOAEの計測が可能であった点に着目し,樹脂製イアチップ単体(方法A)あるいはその先端にガラス製イアチップを装着(方法B)するという2つの方法を用いて10週齢のC57BL/6Jマウスに対してDPOAEの計測を行った.その結果,両方法ともにDPグラムの再現性が認められノイズレベルよりも高いDPレベルが求められた.両方法の比較においては,方法Aは方法Bより安定した高いDPレベルを呈したが,脳定位固定装置(成茂製作所製)による探触子の操作が必要であった.方法Bは方法Aに比べDPレベルは低く安定性は劣ったものの,用手的に探触子を保持しても計測が可能であった.このことにより,マウスDPOAEの計測は脳定位固定装置やガラスチップを使用することにより市販のDPOAE計測器械でも計測できることが明らかになった.この結果に関しては,第105回日本耳鼻咽喉科学会総会(有泉陽介,戸叶尚史,川島慶之,稲垣桂,喜多村健:マウスにおける耳音響放射測定の簡略化に関する検討)において報告した.

小鼠在分子生物学领域被广泛用作疾病模型动物，ABR已普遍用于测量听觉阈值。另一方面，DPOAE已被用于测量外毛细胞的功能，尽管这是一种极好的方法。测试方法反应灵敏，但小鼠耳道较窄，最佳频率较高，导致 DPOAE 测量困难。鉴于 Acoustic 的 DP-2000 能够测量高达 24kHz 的 DPOAE，我们开发了两种方法：单个树脂耳塞（方法 A）或连接到耳塞上的玻璃耳塞（方法 B）10 周的 C57BL。 /6J 母马结果，两种方法都显示了 DPgram 的再现性，并且获得了高于噪声水平的 DP 水平。比较两种方法，方法 A 优于方法 B。虽然表现出稳定的高 DP 水平，但立体定位装置（成重制造）方法 B 的 DP 水平比方法 A 低，稳定性也较差，但即使手动握住探头仍然可以进行测量，这导致使用立体定位装置或玻璃芯片测量小鼠 DPOAE。已经清楚的是，可以使用市售的 DPOAE 测量仪器进行测量。该结果在日本耳鼻喉科学会第 105 届全体会议上报告（Yosuke Ariizumi、Naoshi Tonoha、Yoshiyuki Kawashima、Katsura Inagaki、Ken Kitamura：Otoacoustics in小鼠）这在“辐射测量简化研究”中进行了报道。