内耳障害におけるアポトーシス細胞死と有毛細胞再生の研究

内耳疾病中细胞凋亡和毛细胞再生的研究

基本信息

批准号：
13770981
负责人：
高橋克昌
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

生後の内耳において恒常的にアポトーシスが生じている組織として、Greater epithelial ridge(GER)に着目した。GERは未熟な内耳組織に存在し、生直後から12日齢までの蝸牛内有毛細胞の更に内側に認められ、成熟後の蝸牛では消失する。平成13年度の当該研究において、GERでは生後6日齢を境に、急激なアポトーシスが生じることを明らかにした。本年度は、アポトーシスの実行因子としてのカスパーゼの発現をGERにおいて検討した。現在までに、カスパーゼは1から14までのサブタイプが知られている。種々の死のシグナルを受け取った後に、活性化したカスパーゼ8がカスパーゼ9を活性化させて、更にほかのサブタイプを活性化して、というようにカスケードが形成されている。カスパーゼ3は、その最下流に位置し、実際に細胞にダメージを与える実行因子と考えられている。当該研究では抗カスパーゼ3、9、12、14抗体を使用し、マウスGERでの生後3日齢、6日齢での発現を比較検討した。カスパーゼ3と12とはほぼ同様の発現を示し、生後6日齢のGERにおいて最もよく染まった。陽性細胞の核は分葉化され、形態的にもアポトーシスを呈していた。カスパーゼ9は、各有毛細胞、支持細胞の核に弱く発現しており、GERには認められなかった。潜在的に核内に存在しているが、内耳発生・成熟に関するアポトーシスには関与していないと考えられた。カスパーゼ14は、内外有毛細胞に伸びる有髄神経末端に発現がみられた。GERの消失にはカスパーゼ3と12とが関与したことから、有毛細胞のアポトーシスにもこれらのアポトーシスが重要な働きを示すと考えられる。

我们专注于大上皮山脊（GER），是一种在出生后内耳持续凋亡的组织。 GER存在于未成熟的内耳组织中，并且从出生后至12天的年龄从2天后的毛内毛细胞内进一步发现，并且在成熟的耳蜗中消失。在2001年的这项研究中，GER透露，突然的凋亡发生在六天时。今年，在GER中研究了caspase作为凋亡的性能因子的表达。迄今为止，胱天蛋白酶的亚型范围从1到14。接收到各种死亡信号后，级联反应形成，激活的caspase 8激活caspase 9并激活其他亚型。 caspase 3位于其底部，被认为是实际损害细胞的真正执行因素。在这项研究中，使用3、9、12和14种抗体来比较3和6天大的小鼠GER的表达。胱天蛋白酶3和12显示出几乎相同的表达，并且在6天大时被染色在GER中。呈阳性细胞的核被覆盖并表现出形态凋亡。 caspase 9在每个毛细胞的核中弱表达并支撑细胞，在GER中未发现。尽管它可能存在于细胞核中，但被认为与内耳发育和成熟有关的凋亡无关。 caspase 14在延伸到内部和外毛细胞的髓神经末端表达。胱天蛋白酶3和12参与了GER的消失，人们认为这些凋亡在毛细胞凋亡中也起着重要作用。