前立腺癌に関わる新しい男性ホルモン反応性遺伝子の同定と治療への応用の研究

前列腺癌相关新雄激素反应基因的鉴定及其治疗应用研究

• 批准号: 13770887
• 负责人: 藤浪 潔
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770887/
• 关键词: 前立腺癌; 男性ホルモン; Differential Display法; Differential display法

前立腺癌に関わる新しい男性ホルモン反応性遺伝子の同定のために以下の実験を行った。Androgenにより刺激した男性ホルモン反応性ヒト前立腺癌細胞株LNCaP細胞を採取し、RNAを抽出した。Differential display法(DD法)によりこれらの細胞間で発現の異なる遺伝子断片を取り、sequence解析を行った。その後、この遺伝子断片をNorthern blot解析、または、RT-PCRにより発現の相違の再現性を確認した。DD法により85個の遺伝子断片を採取しsequence解析、Northern blot解析、または、RT-PCRを行い、発現の相違の再現性を確認した遺伝子断片は4つであった。1つはhomosapiens liprin alpha-2 geneとcomplete match(1201-2),2つめはmouse Nkx3.1と75%相同性あり(904-2)、3つめはhuman tcp-1とcomplete match(102-2),4つめはdbESTにてcomplete matchを認める遺伝子断片(35)であった。これらの遺伝子断片はNo.1201-2のみがandrogen down-regulateであり、そのほかはandrogen up-regulateであった。次にNo.1201-2,904-2においてLNCaP以外のandrogen非依存性前立腺癌細胞株(PC3,DU145)においてその発現をRT-PCRにて調べたところ、両者ともLNCaPに比べPC3,DU145では発現が低下していた(No.1201-2ではPC3,DU145では発現は認めなかった)。また、liprin alpha-2 geneがヒト前立腺組織、ヒト前立腺癌組織において発現していることを初めて示した。

进行以下实验来鉴定与前列腺癌有关的新雄激素反应基因。收集雄激素刺激的雄激素反应性人前列腺癌细胞系LNCaP细胞并提取RNA。使用差异显示法（DD法）提取这些细胞之间差异表达的基因片段并进行序列分析。此后，对该基因片段进行Northern印迹分析或RT-PCR以确认表达差异的再现性。使用DD方法收集85个基因片段并进行序列分析、Northern印迹分析或RT-PCR，并且确认了4个基因片段的表达差异的再现性。第一个是与智人liprin alpha-2基因（1201-2）完全匹配，第二个是与小鼠Nkx3.1（904-2）75%同源，第三个是与人类TCP-1（102-2）完全匹配。 2)、在dbEST中发现第四个基因片段(35)完全匹配。这些基因片段中，只有1201-2号为雄激素下调，其余均为雄激素上调。接下来，在第1201-2号和第904-2号中，我们使用RT-PCR研究了其在除LNCaP（PC3，DU145）之外的雄激素非依赖性前列腺癌细胞系中的表达，发现PC3和DU145中的表达较低比LNCaP中的表达要高（在No.1201-2中的PC3或DU145中没有观察到表达）。我们还首次证明了liprin alpha-2基因在人类前列腺组织和人类前列腺癌组织中表达。

项目成果

KIYOSHI FUJINAMI: "Liprinα-2 gene, protein tyrosine phosphatase LAR interactingprotein related gene, is downregulated by androgens in the human prostate cancer cell line LNCaP"International Journal of Molecular Medicine. 10. 173-176 (2002)

KIYOSHI FUJINAMI：“Liprinα-2 基因，蛋白酪氨酸磷酸酶 LAR 相互作用蛋白相关基因，在人前列腺癌细胞系 LNCaP 中被雄激素下调”国际分子医学杂志 10. 173-176 (2002)。