後腎間葉細胞移植による多発性嚢胞腎治療の試み

尝试使用后肾间充质细胞移植治疗多囊肾病

基本信息

批准号：
13770404
负责人：
藤田尚代
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

多発性嚢胞腎は腎不全に至る重篤な遺伝性腎疾患である。嚢胞発生機序として嚢胞上皮細胞の異常増殖が示唆されている。細胞内シグナル伝達における中枢的酵素MAPキナーゼファミリーの一つであるextracellular signal-regulated kinase(ERK)は胎児腎に発現し、ネフロン形成に必要な酵素である。また異形成腎には尿路閉塞が高率に合併する。ヒト多嚢胞性異形成腎およびヒツジ胎仔尿路閉塞モデル腎の嚢胞、異形成尿細管においてERKの発現・活性が増加している。尿管芽由来の異形成上皮では細胞増殖が亢進し、転写因子Pax2、サイトカインTGF-β1の発現が亢進していることが知られている。尿路閉塞の流体力学的変化を、培養マウス尿管芽細胞を周期的伸展(20%、20サイクル/分)および非伸展下で培養することによりin vitroで再現し、ERK活性、細胞増殖、Pax2、TGF-β1発現への影響を検討した。ImmunoblotによりERK、抗活性型ERK、Pax2発現を、BrdU取込みにより細胞増殖を評価した。またTGF-β1 mRNAをRT-PCR法により測定した。ERKは周期的伸展刺激により時間依存性に活性化された。Pax2蛋白発現も時間依存性に増加したがMEK阻害剤PD98059存在下で抑制された。BrdU取込み、TGF-β1 mRNAは24時間伸展で有意に増加したが、MEK阻害により対照と同レベルに抑制された。以上、周期的伸展は尿管芽細胞においてERK活牲化宙介した細胞増殖およびPax2、TGF-β1 mRNA発現を誘導した。ERKの活性化が胎児期尿路閉塞による嚢胞形成に関与する可能性が考えられる。

多囊性肾脏疾病是一种严重的遗传性肾脏疾病，导致肾衰竭。囊性上皮细胞的过度生长被认为是囊肿发育的机制。细胞外信号调节激酶（ERK）是中央酶的一个家族中细胞内信号传导中的激酶，在胎儿肾脏中表达，是肾单位形成所需的酶。另外，发育不良的肾脏与高尿路阻塞率有关。 ERK的表达和活性在人类多囊发育不良肾脏以及绵羊胎儿尿路阻塞模型的肾脏中的囊肿和发育不良小管中增加。众所周知，在源自输尿管芽的发育异常上皮中增加了细胞增殖，转录因子PAX2和细胞因子TGF-β1的表达增加。通过在循环延伸（20％，20个周期/分钟）和非Xtentension中培养培养的小鼠输尿管菌和对ERK活性，细胞增殖，PAX2和TGF-β1表达的影响，在体外的流体动力学变化在体外复制。 ERK，抗活性ERK，PAX2表达通过免疫印迹和通过BRDU摄取的细胞增殖评估。此外，通过RT-PCR测量TGF-β1mRNA。 ERK被循环延伸刺激激活时间依赖。 PAX2蛋白表达也以时间依赖的方式增加，但在MEK抑制剂PD98059的存在下被抑制。 24小时延伸后，BRDU摄取和TGF-β1mRNA显着增加，但被MEK抑制与对照相同的水平。上述循环延伸诱导的细胞增殖是由ERK激活和PAX2和TGF-β1mRNA表达在输卵管中的。由于胎儿尿路阻塞，ERK激活可能参与囊肿的形成。