ミカンキジラミによるカンキツグリーニング病媒介機構に関する研究

柑橘雉传播柑橘黄龙病的机制研究

基本信息

批准号：
02J20004
负责人：
大西純
金额：
$ 1.41万
依托单位：
National Agricultural Research Organization
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度までに、実験的にカンキツグリーニング(Citrus Greening:CG)細菌を保毒させた虫を得る「獲得吸汁法」を確立しており、高率に保毒した個体群を安全に得ることが可能となった。この方法により供給された保毒虫を用いて、今年度は(1)CG細菌の虫体内における増殖性、(2)in situ hybhdization(ISH)法によるCG細菌の局在部位の解析、(3)CG細菌とキジラミ体内共生細菌との局在部位の相互比較を行った。(1)CG細菌の虫体内における増殖性吸汁行動中に変化するCG細菌濃度をReal-time PCR法により定量解析した。最大細菌濃度とその到時間を幼虫と成虫で比較した結果、最大細菌濃度は同程度だか幼虫は短時間に急速に吸汁し、細菌を獲得していることが判明した。一方で、吸汁後に健全植物体上で生育維持し、吸汁後の濃度変化を解析した。成虫では吸汁後から徐々に濃度が低下した。幼虫では羽化成虫後に増加し、細菌が定着・増殖して永続的な伝搬を可能にしていることが示唆された。(2)ISH法によるCG細菌の局在部位の解析吸汁中に進入したCG細菌は、虫体内に定着し永続的に維持されることより、ISH法によりその局在部位の検出を試みた。保毒成虫個体を観察した結果、副唾液腺組織にのみ明瞭なシグナルが認められたが、反応の特異性は低かった。同組織への局在性が示唆されるが、本法の更なる改良により最終的な確認が必要である。(3)CG細菌とキジラミ共生細菌との局在部位共生細菌は腹部の菌細胞という特異な構造物中とその周辺部に局在し、保毒虫、健全虫ともに同じ局在性を示し菌細胞数にも大きな違いが見られなかった。病原細菌と共生細菌との直接的な相互作用はないように思われるが、CG細菌の定着・増殖によるキジラミへの生理的変化など、間接的な影響を今後詳細に検討する必要があると思われる。

到去年，它已经建立了一种实验性的“柑橘绿色：CG）昆虫，可增强细菌，并且可以安全地获得高比例的人群。这是可能的。使用该方法提供的说明，今年（1）细菌细菌中的增殖，（2）通过原位Hybhdization（ISH）（ISH）的CG细菌的局部部分，（3）CG细菌之间局部区域的相互比较和气虱共生和共生细菌。（1）通过实时PCR方法量化了CG细菌昆虫体内增生果汁行为时发生变化的CG细菌浓度。由于将幼虫和成年人与幼虫和到达时间进行比较，细菌浓度大致相同，并且幼虫在短时间内很快被吸吮并获得了细菌。另一方面，果汁后，将生长保持在健康的植物上，并分析果汁后的浓度变化。在成年人中，果汁后浓度逐渐降低。有人认为，出现后幼虫增加，并建立并增殖细菌，从而永久传播。（2）试图通过ISH方法进入CG细菌的分析和吸收的CG细菌，试图通过ISH方法检测局部部分，而不是在昆虫体内定居和维持。由于观察到良好的昆虫个体，仅在补充唾液腺组织中识别信号，但反应的特殊性很低。建议组织的本地化，但最终确认是通过该法律的进一步改进所必需的。（3）CG细菌与气体亚麻共生之间的局部共生细菌位于腹部细菌细胞及其周围的独特结构中，表明在整合和健康的昆虫中都存在相同的定位，并且在相同的定位中没有大差异。数字。似乎病原细菌和共生细菌之间没有直接的相互作用，但是有必要在未来检查间接影响，例如建立CG细菌以及由于类似的增殖而对气体虱子的生理变化。