リン酸化残基改変マウスを用いたNMDA受容体チロミンリン酸化の生理的意義の解明

使用磷酸化残基工程小鼠阐明 NMDA 受体酪氨酸磷酸化的生理意义

基本信息

批准号：
02J07238
负责人：
中澤敬信
金额：
$ 2.5万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

NMDA受容体は記憶・学習との関連が示唆されている長期増強(以下LTP)といったシナプス可塑性に重要な役割を果たしている。また、NMDA受容体のSrc型チロシンキナーゼによるリン酸化は、NMDA受容体の機能の調節に重要な役割を果たしていることが示唆されているが、その生理的意義の実証、及び分子レベルでの裏付けはほとんどなされていない。これまでの研究で、NMDA受容体NR2BサブユニットのSrc型キナーゼによる主要なリン酸化残基としてTyr1472を同定し、海馬CA1領域のLTP誘導に伴い、Tyr1472のリン酸化レベルが顕著に充進することを明らかにしてきた。また、Tyr1472をフェニルアラニンに置換し、Tyr1472がリン酸化を受けなくなった形のNR2Bを発現するY1472Fノックインマウスを独自に作製した。前年度から、電気生理学的解析、行動学的解析を用いて、上記ノックインマウスの解析を行ってきたが本年度はそれをさらに発展させ以下の結果を得た。1 ノックインマウスにおけるエタノール感受性を見出した。2 ノックインマウスではシナプス上でのNMDA受容体の局在に異常が見られた。3 ノックインマウスではNMDA受容体複合体の構成分子に異常が見られた。以上の結果からNR2BのTry-1472のリン酸化はNMDA受容体のシナプス上での局在を規定しており、さらにそれを通じて、脳高次機能を制御している可能性が示唆された。

NMDA受体在突触可塑性中起重要作用，例如长期增强（以下称为LTP），这已被认为与记忆和学习有关。此外，已经建议通过SRC型酪氨酸激酶对NMDA受体的磷酸化，在调节NMDA受体的功能中起着重要作用，但几乎没有证据表明其生理意义和分子支持。先前的研究已将Tyr1472确定为NMDA受体NR2B亚基中SRC型激酶的主要磷酸化残基，表明Tyr1472的磷酸化水平随着海马CA1区域的LTP诱导而显着增加。此外，Y1472F敲入小鼠是独立产生的，用苯丙氨酸代替Tyr1472，以Tyr1472不再被磷酸化的形式表达NR2B。自上一年以来，我们一直在使用电生理和行为分析对敲门小鼠进行分析，今年我们已经进一步开发了这一点并获得了以下结果。 1。在敲入小鼠中发现乙醇敏感性。 2在敲门小鼠中，在突触上观察到NMDA受体定位异常。 3。在敲入小鼠中观察到NMDA受体复合物的组成分子异常。这些结果表明，TRY-1472的NR2B的磷酸化调节NMDA受体的突触定位，通过此，它可能调节更高的脑功能。