角膜移植後の拒絶反応を回避するキメラ角膜組織の作成および免疫特権の機序の解明

创建嵌合角膜组织以避免角膜移植后排斥反应并阐明免疫豁免机制

基本信息

批准号：
13771014
负责人：
堀純子
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Nippon Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

マウスの同所性角膜アログラフト移植モデルにおいて、角膜上皮を除去したドナーアロ角膜の実質表面に、レシピエントと同系の新鮮角膜上皮を被覆してキメラ状に再構築した角膜組織(キメラ角膜と称する)を作成し、移植後の拒絶反応を回避できたことを既に報告した。14年度には、キメラ角膜移植における拒絶反応回避の機序が、active immune suppression(優性抑制)かimmunologic ignorance(免疫学的無視)かを明らかにするための実験を行った。キメラ角膜移植の2週後または8週後の時点で、角膜移植片が透明生着しているレシピエントに、ドナー由来の脾細胞を皮下注射して免疫し、その後の角膜移植片の生着を観察した。その結果、透明生着していた角膜移植片は、脾細胞の皮下注射の後3週以内にほぼ全て拒絶された。したがって、キメラ角膜移植によりactive immune suppressionは誘導されていないことが示された。さらに、透明生着しているキメラ角膜移植片がアロ抗原を発現しており、脾細胞による全身的なアロ抗原感作によって引き起こされた免疫反応の標的となることが示された。以上の結果より、キメラ角膜の拒絶回避の機序が、immunologic ignoranceであることが強く示唆された。また、キメラ角膜作成における同系の角膜上皮の代用組織として、羊膜上皮アログラフトの免疫特権と免疫原性の解析も行った。その結果、羊膜上皮は、種々の免疫抑制因子を発現し、腎被膜下では生着する免疫特権を有していたが、一方、炎症性因子の遺伝子も発現しており、眼表面に移植された羊膜上皮アログラフトは、アロ抗原特異的遅延型過敏反応を誘導し、拒絶反応を生ずることがわかった。

在小鼠骨关注的角膜同种异体移植物植入物模型中，角膜组织（称为嵌合角膜）是通过与供体同种异体实质表面上的接受者相似的新鲜角膜上皮涂层而产生的避免移植后。 2014年，我们进行了一个实验，以确定避免嵌合角膜移植排斥的机制是主动免疫抑制还是免疫学无知。在嵌合角膜移植后的两或八周内，通过皮下注射供体衍生的脾细胞对具有明显角膜移植物的受体免疫，随后观察到角膜移植物的植入。结果，几乎所有清晰的角膜移植物在皮下注射脾细胞的3周内被拒绝。因此，结果表明，活跃的免疫抑制不是由嵌合角膜植入引起的。此外，透明的嵌合角膜移植物表达同种抗原，并被证明是由脾细胞全身性同种抗原敏化引起的免疫反应的靶标。以上结果强烈表明，避免嵌合角膜排斥的机制是免疫学的无知。我们还分析了羊膜上皮同种异体移植物的免疫特权和免疫原性，以替代嵌合角膜生产中的同性角膜上皮。结果，发现羊膜上皮表达了各种免疫抑制因素，并具有植入肾囊下植入的免疫特权，但也表达了炎症因子的基因，并且同种异体上的羊膜上皮移植植入了眼部表面上植入了延迟的性低强度反应反应对异抗反应的反应。