肺癌特異的E1A発現条件下のNK4遺伝子発現増強による肺癌増殖の抑制

在肺癌特异性 E1A 表达条件下增强 NK4 基因表达来抑制肺癌生长

基本信息

批准号：
13218007
负责人：
貫和敏博
金额：
$ 2.94万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

我々はE1B55Kのみを欠損した増殖可能アデノウイルスが高い抗腫瘍効果を示す点に着目し、非小細胞肺癌の多くに発現しているSecretory leukoprotease inhibitor(SLPI)のプロモーターによりE1AとEIB19kをドライブするアデノウイルスベクター(AdSLPIE1A)を作製し、SLPIを分泌する非小細胞肺癌特異的な抗腫瘍効果を検討した。in vitro細胞培養系ではSLPIを分泌しない腫瘍細胞にE1A発現を認めず、SLPIを分泌する腫瘍細胞特異的にEIAを発現し、ウイルス粒子増加による感染細胞の増殖抑制を確認した。in vivoにおいてはSLPI分泌ヒト肺腺癌細胞をマウスに樹立し、AdSLPI.E1Aを腫瘍内投与すると有意な腫瘍増殖抑制効果を示した。更にAdSLPI.E1Aにより腫瘍特異的に発現したEIAが、同時に感染した非複製アデノウイルスベクターにtransに作用し、その腫瘍選択的蛋白発現量亢進をねらい、AdCMV.NK4(HGFを介する癌の浸潤・転移における腫瘍間質相互作用をブロックし、かつ新規血管新生抑制作用をもつHGFのN末ペプチドNK4発現アデノウイルスベクター)をこのAdSLPI.EIAに併用し、in vitor、in vivoでの腫瘍抑制効果の増強について検討した。in vitorの系ではEIA存在下によるウイルスの複製とNK4蛋白発現量の増加を認め、in vivoにおいてもマウス皮下腫瘍のモデルに対し単独投与より更に強い腫瘍増殖抑制効果を認めた。以上の結果は、AdSLPI.E1AとAdCMV.NK4との併用によって非小細胞肺癌選択的に強力な抗腫瘍効果を誘導しうることを示している。

我们关注以下事实：仅E1B55K缺乏的增殖性腺病毒表现出很高的抗肿瘤作用，并创建了使用秘书长的白细胞抑制剂（Slpi）促进的E1A和EIB19K驱动E1A和EIB19K的腺病毒载体（ADSLPIE1A），在许多非细胞cancert and cancers and cancers and cancers and cancers and cancers and the cancers and the cancers and cancers and cancors and非小细胞肺癌分泌SLPI。在体外细胞培养系统中，在不分泌SLPI的肿瘤细胞中未观察到E1a表达，并且EIA在分泌SLPI的肿瘤细胞中特异性表达，并且通过增加病毒颗粒来证实受感染细胞的生长。在体内，在小鼠中建立了SLPI分泌的人肺腺癌细胞，肿瘤内给药ADSLPI.E1A显示出显着的肿瘤生长抑制作用。 Furthermore, EIA, tumor-specific expression by AdSLPI.E1A, transacts on the infected non-replica adenoviral vector, aiming to increase the tumor-selective protein expression level, and uses AdCMV.NK4 (an adenoviral vector expressing the N-terminal peptide NK4 of HGF, which blocks tumor stromal interactions in cancer invasion and metastasis via HGF，并且还具有新型的血管生成抑制作用），以研究Vitor和体内肿瘤抑制作用的增强。在EIA存在下，IN Vitor系统显示出病毒复制和NK4蛋白表达水平的增加，并且在体内还显示出小鼠皮下肿瘤模型的肿瘤生长抑制作用甚至更强。以上结果表明，ADSLPI.E1A和ADCMV.NK4的组合可以选择性地诱导非小细胞肺癌的有效抗肿瘤作用。