人工歯根の周囲における歯根膜の再生に関する研究

人工牙根周围牙周膜再生的研究

基本信息

批准号：
01J03348
负责人：
松村和明
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J03348/
关键词：
人工歯根インプラント EVA チタン歯根膜再生

项目摘要

チタン製インプラントにEVAを固定化し、オゾン処理によりカルボキシル基をEVA表面に導入した上でコラーゲンを固定化した試料を作製した。さらに三次元構造を持った足場としてコラーゲンを塗布し凍結乾燥させコラーゲンスポンジ固定化インプラントを作成した。コラーゲンの溶解性を下げるために160℃で7時間熱架橋を行った。これに歯根膜細胞懸濁液を滴下後、10日間培養を行い歯根膜細胞播種インプラントを作製した。また、乳酸脱水素酵素の測定により、コラーゲンスポンジ内の細胞の増殖を調べたところ、10日でほぼ10^6個に増殖していることがわかった。これを抜歯後2ヶ月経過して抜歯窩が治癒したイヌの顎骨に埋入した。3ヶ月後犠牲死させ顎骨を取り出し、硬組織標本を作製した。組織は約40μmに薄切し、染色を行い顕微鏡観察を行った。結果、チタン単独インプラントでは以前の結果と同様結合組織による被包化が見られた。一方、コラーゲン固定化インプラントでは線維組織がインプラントと垂直方向に見られる部分もあったが、歯肉組織のダウングロースによる繊維性組織がすべてのサンプルで見られた。インプラントを埋入する際、コラーゲンスポンジがあるため少し大きめに顎骨に穴をおけるため、インプラントとの隙間に、倍加時間の短い歯肉細胞が侵入し繊維性組織を形成したものと考えられる。そこで、インプラント埋入時にその上に生体吸収性の組織再生誘導膜(GTR膜)を放置して経過を観察した。その結果、歯肉組織のダウングロースは見られず、コラーゲンスポンジ-細胞増殖型インプラントではインプラントと歯槽骨とを垂直に結ぶ繊維性組織が多く見受けられ、天然歯に近い構造を有することがわかった。去年と今年の結果により、生体適合性を付与したEVA上に三次元に歯根膜細胞を培養し、歯肉組織のダウングロースを防ぐことで歯根膜組織再生型人工歯根の作成の可能性が示唆された。

准备了一个样品，其中将EVA固定在钛植入物上，并通过臭氧处理将羧基引入EVA表面，并将胶原蛋白固定。此外，胶原蛋白被用作具有三维结构的脚手架，并冻干以形成胶原蛋白海绵涂成胶原的植入物。在160°C进行热交联7小时以降低胶原蛋白的溶解度。将牙周韧带细胞悬浮液加入其中，并培养10天以制备牙周韧带细胞种子植入物。此外，通过测量乳酸脱氢酶，检查了胶原蛋白海绵中细胞的增殖，并发现它们在10天内已生长到近10^6。这被植入了一只狗的颚骨，该狗的提取是在拔牙后两个月愈合的。三个月后，牙骨被处死，并取出颚骨以制备硬组织样品。将组织切成约40μm，染色并进行微观观察。结果，单独的钛植入物与结缔组织有关，类似于先前的结果。另一方面，在胶原蛋白污染的植入物中，在垂直于植入物的某些部分中可以看到纤维组织，但是在所有样品中都可以看到由牙龈组织的下降引起的纤维组织。当植入植入物时，存在胶原蛋白海绵，因此颌骨稍大，因此人们认为牙龈较短的牙龈细胞已经渗透到植入物和植入物之间的间隙，形成纤维组织。因此，当植入植入物时，将诱导膜（GTR膜）的可生物吸收组织再生放在膜的顶部以观察进展。结果，未观察到牙龈组织的降低，并且在胶原蛋白海绵细胞增殖植入物中，发现许多连接植入物和肺泡骨的纤维组织垂直连接，并且结构与天然牙齿相似。去年和今年的结果表明，有可能产生人工根，通过在生物相容性EVA上的三个维度培养牙周韧带细胞来再生牙周韧带组织，以防止牙龈组织下降。