タバコ属の種間雑種の致死性をアポトーシスの観点から検証する

从细胞凋亡角度验证烟属种间杂种的致死率

基本信息

批准号：
12876002
负责人：
丸橋亘
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Ibaraki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

(1)シクロヘキシミド処理によるアポトーシスの抑制タバコ属種間雑種(Nicotiana suaveolens x N.tabacum)の実生由来の培養細胞を36℃条件に維持すると正常に増殖するが、これを28℃条件へ移すとアポトーシスを起こして細胞が死滅する。細胞を薄い層にして静置する薄層培養に対して、シクロヘキシミド(翻訳阻害剤)を100μg/mlの濃度で添加して培養した。種々の検査法でアポトーシスの進行状況を調査したところ、アポトーシスが高い程度で抑制されたことを確認した。この雑種細胞におこるアポトーシスにはタンパク質の合成が必要であることが判明した。また、アポトーシス誘導後、一定時間経過してからシクロヘキシミドを処理した。誘導開始2時間目以前に処理すると細胞死が抑制されるが、誘導開始4時間目以降に処理すると抑制されなかったことからこの反応が不可逆になるポイントがアポトーシス誘導後約3時間目に存在していることが明らかになった。(2)Nicotiana debneyi x N.tabacumに見い出された雑種致死現象をアポトーシスタバコ属種間交雑(Nicotiana debneyi x N.tabacum)で得られる雑種実生は致死性を示すことが知られていた。この致死性は高温(34℃)条件では、発現せず、致死性を回避できることがわかった。また、28℃へ移すと致死するが、この際、アポトーシスの種々の特徴を示すことがわかった。また、複二倍体であるN.tabacumの祖先種の1つN.sylvestrisとの交雑を実施したところ、N.debneyi x N.sylvestrisとの交雑により得られた雑種実生は致死し、その細胞死の過程はアポトーシスであることが判明した。

（1）通过环己酰亚胺对香烟物种的凋亡加工（Nicotiana suaveolens X N.Tabacum）抑制凋亡，将天然培养细胞抑制至36°C。该细胞通过醒来而死亡。对于用薄层设置的薄层培养物，以100μg/ml的浓度加入环己酰亚胺（翻译抑制剂）。通过各种测试研究凋亡的进展，可以证实凋亡在高水平的抑制中得到了抑制。发现该杂化细胞中的凋亡具有蛋白质合成。另外，在一段时间后，凋亡诱导后处理环己酰亚胺。在引导的第二个小时开始之前，细胞死亡被抑制，但是该反应是不可逆的，因为在诱导开始4个小时后，它没有被抑制，它存在于诱导后约3小时。。（2）众所周知，在杂种混合物中发现了烟草Debneyi x N.tabacum获得的杂种，并与Apoptiana Debneyi X N.Tabacum一起出现，表明死亡。发现这种致命性不能在高温（34°C）的条件下表达，但可以避免致死性。此外，在移动到28°C时发现它是致命的，但此时显示出各种凋亡的特征。此外，当n.tabacum的祖先之一（是双重twice主体）与N.Sylvestris交叉时，与N.Debneyi X N.Sylvestris交叉获得的杂种寿命被杀死，其细胞被杀死，其细胞被杀死被杀。