発がんプロモーションのメカニズム解明のための鍵化合物の開発

开发关键化合物以阐明致癌促进机制

基本信息

批准号：
12045241
负责人：
入江一浩
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

発がんプロモーターのターゲットは、細胞内情報伝達の鍵酵素であるプロテインキナーゼC(PKC)と考えられている。しかし、PKCを活性化する化合物がすべて発がんプロモーションを引き起こすわけではなく、PKCの活性化だけでは発がんプロモーションを説明できない。本研究者は、PKCが多くのアイソザイムよりなり、それぞれに複数の発がんプロモーター結合部位(ClA、ClBドメイン)が存在することがその大きな理由と考えている。本研究の目的は、天然発がんプロモーターをリードとして、PKCアイソザイムあるいはあるアイソザイムの特定のClドメイン選択的な薬剤を開発することにある。本研究者らは最近、全PKCアイソザイム(PKCα,β,γ,δ,ε,η,θ)のClAおよびClBを個別に化学合成し、これらのホルボールエステル(PDBu)に対する解離定数を正確に決定することに成功した。そこで、これらのペプチドライブラリーと[^3H]PDBuを用いた結合阻害試験によって、いくつかの天然発がんプロモーターの全PKCアイソザイムClドメインに対する結合定数(K_i)を測定した。その結果、インドールアルカロイド系の発がんプロモーターであるインドラクタムVが、novel PKC(δ,ε,η,θ)のClBドメインに選択的に結合することを見いだした。さらに、インドラクタムVのチオアミド誘導体を合成したところ、2はカルシウム依存性のconventional PKC(α,β,γ)に対して1と同様の結合活性を示したが、novcl PKC(δ,ε,η,θ)に対する結合能は約10倍弱かった。本結果は、novcl PKCがconventional PKCと比べて1のアミドカルボニル基を強く認識していることを示唆している。本知見は、PKCアイソザイム選択的な薬剤開発を行う上で、有用な指針となる。

致癌启动子的靶标被认为是蛋白激酶C（PKC），这是一种用于细胞内信号传导的关键酶。但是，并非所有激活PKC引起癌症促进的化合物，并且单独激活PKC不能解释癌症的促进。研究人员认为，这是PKC由许多同工酶组成的重要原因，每个同工酶均具有多个致癌物结合位点（CLA和CLB结构域）。这项研究的目的是为PKC同工酶或某些同工酶开发特定的CL结构域选择剂，并以天然癌症启动子为铅。最近，研究人员分别并成功地确定了这些phorbol酯（PDBU）的分离分离常数。因此，使用这些肽文库和[^3H] PDBU确定了几个天然发生的致癌物启动子的总PKC同工酶CL结构域的结合常数（K_I）。结果，我们发现吲哚生物碱系统的致癌启动子Indolactam V有选择地结合了新型PKC（δ，ε，η，θ）的CLB结构域。此外，当合成Indolactam V的硫酰胺衍生物时，2显示了与钙依赖性常规PKC（α，β，γ）相似的结合活性，但其具有NovCl PKC（δ，ε，ε，η，θ）的结合能力的约为10倍。结果表明，与常规PKC相比，NOVCL PKC强烈意识到1的酰胺羰基。这一发现为开发PKC同学选择药物提供了有用的指南。