核内レセプターHNF4とその転写コファクターの機能解析

核受体HNF4及其转录辅助因子的功能分析

基本信息

批准号：
00J05350
负责人：
廣田恵子
金额：
$ 1.92万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-00J05350/
关键词：
HNF4 転写コファクター核内レセプター FKHR インスリン MODY リン酸化

项目摘要

HNF4は核内レセプタースーパーファミリーに属する転写因子であり、肝臓、腎臓、膵臓、小腸で発現し、標的遺伝子の転写を活性化する。最近、MODY 1(若年発症成人型糖尿病)の原因遺伝子としてHNF4が同定され、成体でのHNF4の役割が注目を集めている。一般に核内レセプターは基本転写因子群との転写開始複合体の形成にコファクターが必須であることが知られている。HNF4のコファクターの同定は転写活性化の分子機構の解明にとどまらず、MODY発症機序の解明に重要な知見を与えるものである。そこで私は、HNF4のコファクターの同定とその機能解析を目的とした。FKHRはインスリン依存的にリン酸化され、それにより細胞質へ移行する転写因子である。最近FKHRがDNA結合性の転写因子としてだけでなく、核内レセプタースーパーファミリーに属するエストロジェンレセプターのコファクターとしても働くことが報告された。そこで私はFKHRがHNF4のコファクターとしても働きうるかについて検討を行った。その結果、FKHRはin vivo、in vitroにおいてHNF4と結合すること、またHNF4を介した転写活性を強く抑制することを示した。そこで、次にFKHRの転写抑制効果がインスリンにより制御されるかについて検討したところ、興味深いことにFKHRの転写抑制効果はインスリン依存的に解除された。これにより、HNF4を介した転写活性はFKHRを介してインスリンにより制御されている可能性が示された。

HNF4是属于核受体超家族的转录因子，在肝脏、肾脏、胰腺和小肠中表达，并激活靶基因的转录。最近，HNF4被确定为MODY 1（青少年成人发病糖尿病）的致病基因，并且HNF4在成人中的作用已引起人们的关注。众所周知，辅因子对于核受体与基本转录因子形成转录起始复合物至关重要。 HNF4辅助因子的鉴定不仅将阐明转录激活的分子机制，也将为阐明MODY的发病机制提供重要的知识。因此，我的目的是鉴定HNF4的辅助因子并分析其功能。 FKHR 是一种转录因子，以胰岛素依赖性方式磷酸化，从而易位至细胞质。最近有报道称，FKHR不仅作为DNA结合转录因子，而且作为雌激素受体的辅助因子，雌激素受体属于核受体超家族。因此，我研究了 FKHR 是否也可以作为 HNF4 的辅助因子。结果表明，FKHR 在体内和体外均能与 HNF4 结合，并强烈抑制 HNF4 介导的转录活性。因此，我们接下来检查了FKHR的转录抑制作用是否受到胰岛素的调节，有趣的是，FKHR的转录抑制作用是以胰岛素依赖性方式释放的。这表明HNF4介导的转录活性可能通过FKHR受到胰岛素的调节。