ポリ(ADP-リボース)合成酵素欠損マウスを用いた神経再建時の細胞死の抑制の研究

聚（ADP-核糖）合酶缺陷小鼠神经重建过程中细胞死亡抑制的研究

基本信息

批准号：
10877333
负责人：
野崎中成
金额：
--
依托单位：
National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

顎顔面領域の神経損傷は麻痺や機能不全を誘発しQOLの低下につながる。申請者は、わが国で唯一ポリ(ADP-リボース)合成酵素(Parp)欠損マウスを作製している。このParp欠損マウスを用いて、本酵素活性の抑制が顎顔面領域の損傷神経再建に有効であるかを調べ、更に損傷神経再建時に本酵素の活性阻害剤を用いることにより再建成績の向上につながる可能性を示すことを目的とする。以下の研究実施計画(1)-(3)に基づき研究を進めている。(1)Parp欠損マウスについて血液、尿、組織の生化学的、病理組織学的な精査を行い表現型を調べる。(2)Parp欠損マウス及び野生型の8週齢オスを用いて、コントロール群と外頚動脈を一時的に結紮し再灌流させる2群に分け、細胞障害の程度と治癒過程を病理組織学的に観察する。Parp欠損マウスにおいて、再灌流時の細胞障害の程度が低下しているか調べる。(3)野生型マウスを用いて種々のParp阻害剤による細胞死の抑制効果を比較検討する。本年度は、申請者らが作製したParp欠損マウスの表現型について詳細な解析を行った。Parp欠損マウスは、致死性を示さず、生殖能は正常であった。臓器、組織の形態的異常も認められなかった(Mol.Cell.Biochem.in press)。さらに、Parp欠損マウスでは、streptozotocin(STZ)投与によるβ-細胞の障害、糖尿病の誘発に対して抵抗性を示した(Proc.Natl.Acad.Sci.USA,96,2301-2304,1999)。Parp欠損マウスはSTZによるDNA損傷が誘発する細胞内NADレベルの低下及びそれに引き続く細胞死に対して抵抗性を有することが示唆された。現在、外頚動脈を一時的に結紮し再灌流する系を用いて、Parp欠損マウスの虚血後再灌流時の細胞障害に対する感受性について検討している。

上颌面区域的神经损伤会引起瘫痪和功能障碍，导致生活质量差。申请人是日本唯一产生聚（ADP-核糖）合酶（PARP）缺陷小鼠的国家。该PARP缺陷小鼠的目的是研究抑制酶活性是否有效地重建了颌面区域的受损神经，并表明在受损神经重建过程中使用酶活性的抑制剂可能会导致改善的重建结果。根据以下研究实施计划（1） - （3）进行研究。（1）通过对血液，尿液和组织的生化和组织病理学检查检查PARP缺陷小鼠以确定表型。（2）使用PARP缺陷的小鼠和野生型为8周大的雄性，我们将对照组和外部颈动脉分为两组，暂时结扎和养殖，细胞损伤的程度和愈合过程将在组织病理学上观察到。我们研究了PARP缺陷小鼠的再灌注过程中的细胞毒性程度是否降低。（3）将对使用野生型小鼠抑制各种PARP抑制剂的细胞死亡进行比较研究。今年，我们对申请人产生的PARP缺陷小鼠的表型进行了详细分析。缺乏PARP的小鼠没有致死性，并且生育正常。没有观察到器官或组织的形态异常（Mol。Cell。Biochem.inPress）。 Furthermore, Parp-deficient mice showed resistance to β-cell damage and induction of diabetes by administration of streptozotocin (STZ) (Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 96, 2301-2304, 1999).有人提出，缺乏PARP的小鼠对STZ DNA损伤诱导的细胞内NAD水平降低和随后的细胞死亡具有抗性。目前，我们正在研究缺乏PARP缺陷小鼠对缺血后再灌注期间细胞损伤的敏感性，该系统使用暂时绑扎和再灌注外部颈动脉的系统。