末梢単核球内でのC型肝炎ウイルスの感染：持続感染への関与

外周单核细胞丙型肝炎病毒感染：参与持续感染

• 批准号: 10670282
• 负责人: 清水 洋子
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10670282/
• 关键词: C型肝炎ウイルス; 末梢単核球; 持続感染

本研究の目的はC型肝炎患者体内において,肝臓の他に末梢単核球(PBMC)でもC型肝炎ウイルス(HCV)の増殖が起こっているか否かを調べ,PBMC内でのウイルス増殖が持続感染成立に関与する可能性即ちPBMCがHCVのリザーバーとなっているか否かを明らかにすることである。本年度の研究でPBMC内におけるHCV増殖を確認することが出来た。長期間フォローアップされている実験感染チンパンジー及びヒト患者より採取した肝組織及びPBMCからRT/PCR法によりHCVRNA複製中間体である(-)鎖が検出された。両組織から検出されたHCV遺伝子の超可変領域を比べると相異なっており肝組織をPBCでは異ったバリアントがメジャーポプレーションとして存在することが分った。更に持続感染患者より得たPBMCを2カ月間培養した後RT/PCR法でHCVRNAを検出した所陽性であった。現在in situ PCR法による確認も試みている。

这项研究的目的是研究肝炎病毒（HCV）是否也发生在肝脏中，以及周围的单核细胞（PBMC），并确定PBMC内病毒的生长是否可能参与持续性感染的形成，即PBMC是否是HCV的储层。今年的研究证实了PBMC的HCV增长。 HCVRNA复制中间体（ - ）通过肝组织中的RT/PCR检测到了从实验感染的黑猩猩和人类患者中收集的PBMC，并经过了很长一段时间。当比较两种组织中检测到的HCV基因的高变量区域时，发现在PBC中，存在不同的变体作为肝组织中的主要种群。此外，从持续感染的患者中培养了2个月的PBMC，然后通过RT/PCR检测HCVRNA，测试为阳性。当前，我们还试图使用原位PCR方法确认。

项目成果

Shimizu,Y K et al: "Sequence Analysis of the Hepatitis C Virus CTenome Recovered from Serum,Liver and Peripheral Biood Mononuclear Cells of Intected Chinpanzees" Journal of Virelogy. 71. 5769-5773 (1997)

Shimizu,Y K 等人：“从受感染黑猩猩的血清、肝脏和外周单核细胞中回收的丙型肝炎病毒 CTenome 的序列分析”病毒学杂志。

Hanaki,K et al: "Two different reactions involved in the primer/template-independent polymerization of dATP and dTTP by Tag DNA polymerase" Biochem Biophys Res Commun. 244. 210-219 (1998)

Hanaki,K 等人：“通过标签 DNA 聚合酶，涉及 dATP 和 dTTP 的引物/模板独立聚合的两种不同反应”Biochem Biophys Res Commun。

Shimizu,Y K et al: "Infection of a chimpanzee with hepatitis C virus grown in cell culture" Journal of General Virology. 79. 1383-1386 (1998)

Shimizu,Y K 等人：“细胞培养物中生长的丙型肝炎病毒感染黑猩猩”《普通病毒学杂志》。

Nakajima,N.et al: "Hybridization-AT-Tailing(HybrAT)method for sensitive and strand-specific detection of DNA and RNA" Biochem Biophys Res Commun. 248. 613-620 (1998)

Nakajima,N.等人：“用于 DNA 和 RNA 的灵敏和链特异性检测的杂交 AT 拖尾 (HybrAT) 方法”Biochem Biophys Res Commun。