多因子遺伝精神疾患の発症を免れるゲノム内機構と精神分裂病関連遺伝子の解明

阐明逃避多因素遗传性精神疾病和精神分裂症相关基因发病的基因组机制

基本信息

批准号：
10307022
负责人：
岡崎祐士
金额：
$ 20.54万
依托单位：
Mie University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

(1) 精神分裂病、躁うつ病(双極性気分傷害)、パニック障害、自閉症、ナルコレプシーなど、多因子遺伝が想定される精神疾患について、同じ遺伝子型を有しながら双生児の片方が罹患しない一卵性双生児不一致例の全ゲノム比較により罹患を免れるゲノム内機構を解明することが目的の一つである。具体的には不一致例の罹患者と非罹患者ゲノム差異をgenomic scanning法で検出・クローニングし、発現抑制関連DNA部位を見いだそうとする研究である。本年度は、レアカッター制限酵素の認識配列をゲノム上の位置指標(ランドマーク)としてCpGアイランドを捉え,遺伝子を探索しようとするFluorescence Representational Genomic Profiling(FRGP)法を開発した.ランドマーク制限酵素にEag Iを用いたFRGP法を男子一卵性双生児躁うつ病(双極性障害)不一致例に適用したところ,ゲノムプロファイル約540座位のうち6座位(変異)が認められた.塩基配列解析の結果,1座位はヒトのCpGアイランドであることが明らかとなった.遺伝子歩行による変異DNA断片近傍の遺伝子の同定が次に必要である.一方、昨年度までに旧RLGS法で濃度差異を見出した分裂病一卵性双生児不一致例のスポットは、Gene Trapperを用いてスポットを多数打ち抜き、electroelutionでDNAを回収し、PCR増幅してベクターに組み込む方法でクローニングに成功した。そのクローンの一部は、シークエンスがヒト脳で発現している既知遺伝子の一部とホモロジーをもつなど興味ある結果が得られた。今後クローンの分子遺伝学的・分子生物学的検索が必要である。(2) もう1つの課題は、分裂病に関連する遺伝子座位(感受性遺伝子座位)を、日本人の複数同胞罹患家系の連鎖解析によって染色体上にマッピングし、関連遺伝子の同定をめざす研究である。全国的共同研究グループ(略称JSSLG)参加施設は大学18、国立研究所2,公立病院1、合計21施設となった。1999年12月集計で約140家系、300人を超える罹患同胞対家系のDNA標本が収集された。両親を含む完全家系は30家系を超えたが、なお少ない。現在、1次連鎖解析(遺伝子型決定)が7つの解析担当施設で始められている。この結果はわが国初の分裂病の連鎖解析結果となる。

（1）预期多因素遗传的精神疾病的目的之一，例如精神分裂症，躁狂抑郁症（躁狂情绪损伤），恐慌症，自闭症和麻醉症，是为了阐明可以通过比较具有相同基因类型的识别型双胞胎的疾病生存的基质内机制。具体而言，这项研究涉及使用基因组扫描方法检测和未受影响患者之间的基因组差异，以找到表达抑制的DNA位点。今年，我们开发了一种荧光代表性基因组分析（FRGP）方法，该方法使用稀有切割器限制酶的识别顺序作为基因组位置指标（地标）来搜索基因。当我们使用EAG I作为具有里程碑意义的限制酶应用于男性同卵双胞胎中时，将大约540个基因组基因座中的六个基因座（突变）作为具有里程碑意义的限制酶。基础序列分析的结果表明，一个基因座是人类CpG岛。必须通过步态对突变的DNA片段附近的基因进行下一个必要的鉴定。同时，去年被旧的RLGS方法发现精神分裂症相同的双胞胎的浓度不同的地方是基因，使用捕获器用捕获器冲出了大量斑点，通过电灭绝，PCR扩增和通过将其纳入载体来收集DNA。获得了有趣的结果，例如与人脑中一些已知基因具有同源性的序列。将来需要对克隆进行分子遗传和分子生物搜索。（2）另一个挑战是通过对受多个兄弟姐妹影响的日本家庭的链接分析并鉴定相关基因来绘制染色体上与精神分裂症相关的基因座（灵敏度基因座）。国家联合研究小组（缩写为JSSLG）设有总共21个设施，其中包括18所大学，2所国家实验室和1家公立医院。 1999年12月，收集了来自约140个家庭和300多个受影响的兄弟姐妹与家庭的DNA标本。有30多个完整的家庭，包括父母，但仍然很少。当前，主要的链接分析（基因分型）正在负责分析的七个设施。该结果是日本精神分裂症链分析的第一个结果。