組換え修復系が関与するテロメア制御機構
涉及重组修复系统的端粒控制机制
基本信息
- 批准号:10165205
- 负责人:
- 金额:$ 1.34万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
- 财政年份:1998
- 资助国家:日本
- 起止时间:1998 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
テロメアは線状染色体の末端を構成するDNA・タンパク質複合体であり、その正常な機能の維持が染色体機能にとって必須であることが明らかになっている。我々は分裂酵母を材料に、テロメアDNA機能構造の維持機構の分子レベルでの解析を行っている。これまでに、細胞内でのDNA損傷への応答に関与するチェックポイント遺伝子のうち、実際にDNAを直接監視するディテクター分子であるrad1^+、rad17^+、そのシグナルを下流に伝えるトランスミッターとして機能するrad3^+、rad26^+がテロメア長の維持に関わっていることを示してきた。rad3^+によるシグナルは最終的にはCdc2の活性を抑制し、細胞周期の停止を導く。しかし、rad3などの変異株で見られるテロメア長の異常は細胞周期の停止によっては抑圧されない。このことからテロメア維持には細胞周期調節以外のrad3^+の標的因子が関わっていることが明らかになった。このことはrad3^+の下流で働き、Cdc2の活性を調節するプロテインキナーゼChk1^+、cds1^+を同時に破壊した株でもテロメア長が正常であることからも支持された。rad3^+のテロメア長維持に関わる機能の解析のため、Rad3タンパク質の中央の調節ドメインにランダムな突然変異を導入し、種々の特異的アレルの単離を試みた。その結果、テロメア特異的な表現型を示すものの細胞周期チェックポイント機能が正常なアレル、Rad3のすべての機能が温度感受性を示すアレルが単離された。これらのアレルを用いることで、Rad3の機能欠損によるテロメア短縮の経時変化を検討した。その結果、短縮には約30回の分裂が必要であるが、正常な長さへの復帰は直ちにおこることを見出した。現在、これらのアレルを用い、Rad3の標的分子の単離を試みている。
端粒是构成线性染色体末端的DNA/蛋白质复合物,研究表明维持其正常功能对于染色体功能至关重要。我们以裂殖酵母为材料,在分子水平上分析端粒DNA功能结构的维持机制。到目前为止,在细胞中参与 DNA 损伤反应的检查点基因中,rad1^+ 和 rad17^+ 是实际上直接监测 DNA 的检测分子,而 rad1^+ 和 rad17^+ 则充当向下游传输信号的发射器。我们已经证明 rad3^+ 和 rad26^+ 参与维持端粒长度。 rad3^+ 信号最终抑制 Cdc2 活性,导致细胞周期停滞。然而,在 rad3 等突变株中观察到的端粒长度异常并不会被细胞周期停滞所抑制。这些结果表明,除了细胞周期调节之外,rad3^+ 靶因子也参与端粒维持。即使在蛋白激酶 Chk1^+ 和 cds1^+(作用于 rad3^+ 下游并调节 Cdc2 活性)同时被破坏的菌株中,端粒长度也是正常的,这一事实也支持了这一点。为了分析rad3^+在维持端粒长度方面的功能,我们在Rad3蛋白的中央调节域中引入随机突变,并尝试分离各种特定的等位基因。结果,我们分离出一个具有端粒特异性表型但细胞周期检查点功能正常的等位基因,以及一个在所有 Rad3 功能中都具有温度敏感性的等位基因。通过使用这些等位基因,我们研究了由于 Rad3 功能丧失而导致端粒缩短的时间过程。结果,他们发现缩短需要大约 30 个分区,但会立即恢复正常长度。我们目前正在尝试使用这些等位基因分离 Rad3 靶分子。
项目成果
期刊论文数量(3)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Naito,T.: "Circular chromosome formation in a fission yeast mutant defective in two ATM-homologues." Nature Genet.20. 203-206 (1998)
Naito,T.:“两个 ATM 同源物缺陷的裂变酵母突变体中的环状染色体形成。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Yamada,M.: "Y'-Helpl.a DNA helicase encoded by the yeast subtelomeric Y'element is induced in survivors defective for telomerase." J.Biol.Chem.273. 33360-33366 (1998)
Yamada,M.:“Y-Helpl.a 由酵母亚端粒 Y 元件编码的 DNA 解旋酶在端粒酶缺陷的幸存者中被诱导。”
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
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