成長ホルモン作用異常の分子機構

生长激素异常作用的分子机制

• 批准号: 08671161
• 负责人: 加治 秀介
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08671161/
• 关键词: 成長ホルモン; 成長ホルモン遺伝子; 成長ホルモン結合蛋白(GHBP); 成長ホルモン受容体遺伝子; 成長障害; インスリン様成長因子(IGF-1)

1.不活性型GHの病態解析臨床的に不活性型GHが疑われた症例のGH遺伝子にヘテロのミスセンス変異(D112G)を認め、蛋白レベルでは変異型GHが優位に発現していた。GST融合蛋白として大腸菌で作成した変異GHとGH結合蛋白(GHBP)とのcomplexの分子量はHPLCの結果1:1で野性型GH-GHBPの1:2と比較してダイマー化の障害が示唆された。変異GHではIM9細胞でのGH受容体(GHR),JAK2,STAT5のリン酸化の低下と、GHR細胞外ドメイン、thrombopoietin受容体細胞質ドメインのキメラcDNAを導入したBaF/3-GM細胞での代謝反応の低下を認めた。2.GHR異常症の病態解析(A)G724Tと981Cの1塩基欠失(981C-del)を認めた複合ヘテロ例の父と兄には981C-del、母にはG724TをPCR-direct sequence,PCR-RFLPで確認した。父のリンパ球よりGHR mRNAをRT-PCR、direct sequenceしたところ正常GHRのみ発現していた。G724Tは発現しても細胞外ドメインの一部で(E224X)、981C-delは十分に発現しないとすれば本症例の高度の成長障害(-7.6SD)と血中GHBP低値(検出感度以下)は説明しうる。(B)GH不応性とGHBP高値(896,871 pmol/l)を呈した低身長(-3.0,-3.5 SD)兄妹例でGHRイントロン9のsplice donor siteにGからAへのヘテロの変異を認めた。母と兄妹のリンパ球GHR mRNAはRT-PCR,direct sequenceよりexon9のskipとframe shiftによりexon10では3アミノ酸が置換された後、終止コドンとなった。今後本例ではヘテロでの発症とGHBP高値の原因解明のため変異GHRを作成し、in vitroでの検討が必要である。

1。病理GH对GH的病理分析在临床上灭活的GH中，在怀疑GH的情况下，在GH基因中观察到了异常的感觉突变（D112G）。突变体GH和GH组合蛋白（GHBP）之间复合物的分子量作为GST融合蛋白在HPLC中为1：1，这表明与野生GH-GHBP 1：2。TA相比，较小的障碍物。在IM9细胞中的变体GH，GH受体（GHR）中，JAK2，STAT5，GHR细胞结构域的磷酸化降低GM单元我承认减少。 2。g724t和981c 1碱基损失（981C-DEL）PCR主导序列的病理分析，G724T为981C-DEL，对综合杂种的父亲和兄弟是981c-del。我父亲淋巴细胞的RT-PCR和GHR mRNA的直接序列仅表示正常的GHR。即使表达了G724T，它也是细胞外结构域（E224X）的一部分，如果981C-DEL无法完全表达该病例的高生长障碍（-7.6SD），而血液GHBP低（检测）灵敏度低于检测灵敏度。 （b）低身份（-3.0，-3.5 SD），具有无支撑的GH（896,871 pmol/l）（-3.0，-3.5 SD）一个兄弟姐妹从GHR内含子9个剪接供体站点识别Hetero。淋巴细胞GHR mRNA是母亲和兄弟姐妹，在3个氨基酸被Exon9跳过并从RT-PCR（直接序列）移动后，结束了密码子。在这种情况下，将创建一个突变的GHR，以阐明异质发作的原因和高GHBP高值的原因，并且有必要在体外考虑。

项目成果

Hidesuke Kaji: "Normal bone mineral density in patients with adult onset GH deficiency" Endocrinology and Mefabolism. (in press).

Hidesuke Kaji：“成人生长激素缺乏症患者的正常骨密度”内分泌学和分解代谢。

Satoko Wada: "Characterization of GH_3 cells overexpressing FGF-2" Journal of Neuroendocrinology. (in press).

Satoko Wada：“过度表达 FGF-2 的 GH_3 细胞的表征”神经内分泌学杂志。

Kazuo Chihara: "International Ceminar on Nutrition in Health and Disease" Lucila B. Raluco,Kazuo Chihara and Masato Kawabata, 4 (1996)

Kazuo Chihara：“国际健康与疾病营养研讨会” Lucila B. Raluco、Kazuo Chihara 和 Masato Kawabata，4 (1996)

Yutaka Takahashi: "Short stature caused by a mutant growth hormone with an antagonistic effect." Endocrine Journal. 43. S27-S32 (1996)

高桥丰：“由具有拮抗作用的突变生长激素引起的身材矮小。”

Yutaka Takahashi: "Leptin induces tyrosine phosphorylation of cellular proteins in cluding STAT-1 in human renal adenocarcinoma cells,ACHN" Biochemical and Biophysical Research Communications. 228. 859-864 (1996)

Yutaka Takahashi：“瘦素诱导细胞蛋白酪氨酸磷酸化，包括人肾腺癌细胞中的 STAT-1，ACHN”生物化学和生物物理研究通讯。