グアニリン産生細胞の免疫学的、分子生物学的同定とその生理作用の研究

鸟苷酸产生细胞的免疫学和分子生物学鉴定及其生理作用研究

基本信息

  • 批准号:
    08670578
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.54万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    1996
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1996 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

大腸菌の熱耐性エンテロトキシンに類似の構造をもつペプチド、グアニリンの産生細胞を同定するために、ヒトのプログアニリンのN端フラグメント(1-15)を化学合成した。サイログロブリンまたはKLHとコンジュゲートした合成ペプチドを抗原として、家兎に免疫し、プログアニリンN端フラグメントに特異抗体を得た。本抗体を用いて、プログアニリン産生細胞を免疫組織学的に検索した。本抗体によりヒトの胃および十二指腸の基底膜顆粒細胞が免疫染色された。この反応は、抗体に合成フラグメントを添加することにより完全に吸収された。ヒトと同様にラットでも、消化管の内分泌細胞が特異的に染色された。同一切片における二重染色によりプログアニリン陽性細胞はセロトニンを含有せず、ソマトスタチンを含有することから、D細胞であると推定された。グアニリンの受容体および標的細胞を同定するために、ラクトパーオキシデ-ス法により、^<125>I標識グアニリンを作成した。標識グアニリンのラット小腸粘膜標本に対する結合実験からグアニリンは耐熱性エンテロトキシンと同等の解離定数(約10^<-6>M)をもつことが判明した。この標識グアニリンをラットに経静脈的に投与し、in vivoオートラジオグラフィーを行った。最も放射活性の取り込みの高い臓器は腎臓であった。消化管では杯細胞からの粘液の分泌と粘膜下組織の浮腫を認めた。一方、腎臓では近位尿細管上皮からの取り込みと、集合管の主細胞からの尿中への排泄ならびに利尿効果が形態学的に認められた。以上の成績から、グアニリンは、当初考えられたいたように消化管の管腔内に分泌されるだけでなく、パラクラインホルモンとして消化管粘膜における水の吸収と、内分泌ホルモンとして腎臓における尿生成の調節に関与している可能性が考えられた。
合成了人类进步的人类(1-15)的肽(1-15)(1-15),以鉴定肽的结构与大肠杆菌的热耐药性肠毒素相似,以识别鸟嘌呤产生的细胞。用Sylog Robulin或KLH结合物的合成肽是抗原,兔子是免疫力,并且在进步进步的进步进步方面获得了特殊的抗体。使用这种抗体,这是一种免疫史切开术,以搜索产生雌激素的细胞。染料的人体和十二个肠道细胞的身体是免疫。通过将合成片段添加到抗体中,完全吸收了该反应。像人类一样,胃肠道的内分泌细胞通常在大鼠中染色。据估计是D细胞,因为所有碎片中的染料细胞都不包含5-羟色胺,而是含有索诺丁汀类药物。为了鉴定鸟氨酸的受体和靶细胞,创建的乳 - 氧化物定律^<125>我签署了吉拉尼氨酸。标记为蓝胶膜膜标本的结合实验表明,圭尼蛋白具有与耐热外壳相同的解剖常数(约10^<-6> m)。该标志是在大鼠的大鼠中给予的,并进行了体内自动无线电图。最高的放射性器官是肾脏。在消化道中,观察到粘液从杯子细胞和粘膜下组织的水肿分泌。另一方面,在肾脏中,近临床管上皮的掺入,尿液中主要细胞的集体管的排泄以及利尿作用得到了适度识别。基于上述结果,圭尼蛋白不仅在最初考虑的消化道的输卵管腔中分泌,而且还可以在消化粘膜中吸收水作为帕克林激素,而在肾脏中作为内分泌激素在肾脏中出生。他们参与了调整。

项目成果

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