Development of cancer-specific monoclonal antibodies to the Eph receptor and analysis of their recognition mechanisms

Eph受体癌症特异性单克隆抗体的研制及其识别机制分析

基本信息

批准号：
22KJ0297
负责人：
七宮蓮
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

Eph receptor B4 (EphB4)は乳がんや肺がんなどの複数のがんにおいて高発現している膜タンパク質であり、がん細胞の増殖、浸潤、転移、及び血管新生に寄与することが報告されている。しかし、EphB4は静脈内皮細胞を中心とした多くの正常細胞においても発現が認められ、副作用の観点から、がん細胞特異的なEphB4に対するモノクローナル抗体の開発が望まれている。そこで本研究では、がん細胞特異的に膜タンパク質を認識するモノクローナル抗体を作製する手法であるCasMab法を用いて、がん細胞特異的な抗EphB4抗体の開発を目指している。我々は最初に、Cell-Based Immunization and Screening (CBIS)法を用いて、がん細胞に内在的に発現するEphB4を特異的かつ高感度に認識する抗EphB4抗体の作製を目指した。その結果、フローサイトメトリーやウェスタンブロット、免疫組織染色といった、全てのアプリケーションに使用可能である抗EphB4モノクローナル抗体であるB4Mab-7の作製に成功した。また、B4Mab-7以外にも、がん細胞に発現するEphB4を特異的に認識するモノクローナル抗体を多数作製することに成功している。今後は、フローサイトメトリーを用いて正常細胞のEphB4には反応せず、がん細胞のEphB4のみに特異的に反応性を示す抗EphB4モノクローナル抗体のスクリーニングを実施する。さらに、in vitroとin vivoの両方においてがん特異的な抗EphB4抗体による抗腫瘍効果を検討し、そのメカニズムの解明を目指している。

Eph受体B4（EphB4）是一种膜蛋白，在乳腺癌和肺癌等多种癌症中高表达，据报道有助于癌细胞增殖、侵袭、转移和血管生成。然而，EphB4也在许多正常细胞、主要是静脉内皮细胞中表达，并且从副作用的角度来看，期望开发针对EphB4的癌细胞特异性单克隆抗体。因此，在本研究中，我们的目标是使用CasMab方法开发癌细胞特异性抗EphB4抗体，这是一种生产特异性识别癌细胞膜蛋白的单克隆抗体的方法。我们首先旨在使用基于细胞的免疫和筛选 (CBIS) 方法创建一种抗 EphB4 抗体，该抗体能够特异性、灵敏地识别癌细胞内源表达的 EphB4。结果，他们成功生产了 B4Mab-7，这是一种抗 EphB4 单克隆抗体，可用于流式细胞术、蛋白质印迹和免疫组织学染色等所有应用。除了B4Mab-7之外，我们还成功生产了多种特异性识别癌细胞中表达的EphB4的单克隆抗体。未来我们将利用流式细胞术筛选不与正常细胞中的EphB4发生反应，而仅与癌细胞中的EphB4发生特异性反应的抗EphB4单克隆抗体。此外，我们正在体外和体内研究癌症特异性抗EphB4抗体的抗肿瘤作用，旨在阐明其机制。

项目成果

期刊论文数量（1）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Defucosylated Mouse-Dog Chimeric Anti-Human Epidermal Growth Factor Receptor 2 Monoclonal Antibody (H77Bf) Exerts Antitumor Activities in Mouse Xenograft Models of Canine Osteosarcoma

去岩藻糖基化小鼠-狗嵌合抗人表皮生长因子受体 2 单克隆抗体 (H77Bf) 在犬骨肉瘤小鼠异种移植模型中发挥抗肿瘤活性

DOI：
10.1089/mab.2022.0022
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
Nanamiya Ren;Ohishi Tomokazu;Suzuki Hiroyuki;Mizuno Takuya;Yoshikawa Takeo;Asano Teizo;Tanaka Tomohiro;Kaneko Mika K.;Kato Yukinari
通讯作者：
Kato Yukinari