体表粘液を利用した大型海産魚類の早期雌雄判別

利用体表粘液早期判断大型海洋鱼类性别

基本信息

批准号：
07760188
负责人：
竹村明洋
金额：
$ 0.58万
依托单位：
University of the Ryukyus
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

カンパチ及びスジアラの雌特異蛋白質(ビテロゲニン)を、エストロゲン処理した試供魚の血しょうからハイドロキシルアパタイトカラムとゲル濾過を使って精製し、ビテロゲニンの物理化学的性状の一部を明らかにすると共に、それぞれのビテロゲニンに特異的に反応するウサギ抗体を作製した。次いで特異抗体を利用したビテロゲニンの微量測定系(酵素免疫測定法もしくはドットブロッティング)を確立し、体表粘液中のビテロゲニンの有無を調べ、体表粘液の早期雌雄判別への利用の可能性を検討した。カンパチのビテロゲニンの分子量はゲル濾過で約43万と推定された。ビテロゲニンに対する抗体を利用した免疫電気泳動で、エストロゲン処理した魚から得た血しょうは反応し、少なくとも2本の沈降線を形成したのに対し、未熟魚のそれは全く反応しなかった。酵素免疫測定法では成熟雌の血清及び体表粘液は反応したのに対し、成熟雄の血清及び体表粘液は反応しなかった。この結果から、成熟雌の体表粘液には血液中のビテロゲニンと免疫学的に相同な成分が含まれていることが明らかになった。体表粘液中のビテロゲニンは1月の個体から検出でき、体表粘液にビテロゲニンが確認できた個体において血液中にもビテロゲニンが認められた。以上の結果から、カンパチの体表粘液に見いだされるビテロゲニンは血中のビテロゲニンと同じく早期の雌雄判別に利用できる可能性が示された。スジアラのビテロゲニンの分子量もゲル濾過で約43万と推定された。ビテロゲニンに対する抗体を利用した免疫拡散法で精製したビテロゲニンは卵抽出物と反応し、沈降線を形成したのに対し、雄の血清とは反応しなかった。本種のビテロゲニンは4才魚の血中から初めて検出できるようになったことから、スジアラの一部は人為飼育下においてこの年齢から成熟を開始することが明らかになった。ドットブロッティングでは体表粘液にもビテロゲニンが検出できたことから、本種においても体表粘液のビテロゲニンが早期の成熟雌の区別化に利用できる可能性が示された。

使用羟基磷灰石柱和凝胶过滤从雌激素治疗的鱼的血浆中纯化了Amberjack和Sudiara（Vitelogenin）的雌性特异性蛋白质，以揭示富有肽蛋白的某些物理化学特性，并与每种植物蛋白有关。接下来，建立了使用特定抗体（酶免疫测定或DOT印迹）的育蛋白的痕量测量系统，并检查了身体表面粘液中植物蛋白的存在或不存在，并检查了使用身体表面粘液对男性和女性进行早期歧视的可能性。通过凝胶过滤估计，amberjack施气蛋白的分子量约为430,000。在使用抗植物蛋白抗体的免疫电泳上，雌激素的血浆反应并形成至少两条沉积物线，而未成熟鱼类的血浆根本没有反应。在酶免疫测定中，成熟雌性的血清和身体表面粘液反应，而成熟雄性的血清和身体表面粘液反应。这些结果表明，成熟雌性的表面粘液包含血液中植物蛋白的免疫学成分。一月份在个体中检测到人体表面粘液中的植物蛋白，并且在身体表面粘液中证实植物蛋白的血液中也发现了植物蛋白。上述结果表明，在Amberjack表面粘液中发现的植物蛋白可用于早期歧视性别，就像血液中的维生蛋白一样。通过凝胶过滤估计，Sudiara中viter蛋白的分子量也约为430,000。通过免疫填充法纯化的植物蛋白使用抗蛋白质的抗体与卵提取物反应并形成沉淀线，而它与雄性血清没有反应。可以在四岁鱼类的血液中首次检测到该物种的植物素，并且已经发现，在人工囚禁中，一些西迪亚拉开始成熟。 DOT印迹还检测到人体表面粘液中的施用植物素，表明体面粘液也可用于区分该物种的成年女性的早期。