パルス電磁場刺激が骨芽細胞様細胞の分化に与える影響-ヒト正常骨由来芽細胞様株SV-HFOによる検討-

脉冲电磁场​​刺激对成骨细胞样细胞分化的影响 - 使用人正常骨源性胚细胞样细胞系 SV-HFO 的研究 -

• 批准号: 07771872
• 负责人: 広瀬 由紀人
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: Health Sciences University of Hokkaido
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771872/
• 关键词: パルス電磁場刺激; SV-HFO; 分化の発現; 骨形成促進作用

ヒト正常骨由来の骨芽細胞様細胞であるSV-HFOを使用し、パルス電磁場刺激がSV-HFOの分化に与える影響をついて検討を行なった。SV-HFOの培養はα-MEMに10%FBSを含む培地で行なった。SV-HFOを10^6cell/35mmdishの密度で藩種し、細胞がコンフルエント達成後に理研式パルス電磁場刺激装置を使用して磁場強度3Gauss(0.3mT)、周波数100Hz、パルス幅23μsecの刺激を作用させた。この場合、アルカリホスファターゼ活性ならびにオステオカルシン産生量の検討を行なった結果、実験群と通常培養の対照群の比較で実験群に分化促進蛍光がみられたものの有意な差を認めなかった。パルス電磁場刺激の細胞増殖促進作用は細胞藩種直後から同刺激条件で細胞を刺激した場合、セル・カウントならびにXTTassayによる検討で、実験群が通常培養の対照群に比較して1.3倍の促進を認めた。従って、培養開始直後よりSV-HFOを刺激すると細胞増殖が促進し、コンフルエントに達成までの時間が短縮され、分化の発現が促進されることが推測される。これをin vivoにおきかえて考察すると、パルス電磁場刺激は正常な状態にある既存の骨組織に対して効果は少ないが、損傷が与えられた直後の骨組織に対しては骨形成促進作用の能力を持ってると思われる。in vitroにおいて、単にパルス電磁場刺激のみでSV-HFOの分化を促進させることは難しいと思われる。現在、SV-HFOにdexametason、1α25-dihydroxyvitamineD_3などを作用させると経時的に分化を起こすことを確認し、パルス電磁場刺激がこれらの分化促進物質との併用でその分化促進作用を増強できるのかどうかを検討している。

使用SV-HFO，一种源自正常人骨的成骨细胞样细胞，我们研究了脉冲电磁场​​刺激对SV-HFO分化的影响。将SV-HFO培养在含有10％FB的α-MEM中的培养基中。 SV-HFO在10^6cell/35mmdish的密度下变化，并且在细胞汇合后，使用Riken型脉冲电磁场​​刺激器来刺激3GAUSS（0.3MT）的磁场强度，100Hz的频率，100Hz的频率和23μsec的脉冲宽度。在这种情况下，研究了碱性磷酸酶活性和产生的骨钙素的量，尽管在正常培养中观察到实验组和对照组之间观察到促进分化的荧光，但未观察到显着差异。当细胞物种后立即在相同的刺激条件下刺激细胞时，在相同的刺激条件下刺激细胞时，实验组比对照组促进了1.3倍。因此，据推测，培养开始后立即刺激SV-HFO会促进细胞的增殖，缩短直到达到汇合的时间，并促进分化的表达。考虑到这个体内，看来脉冲电磁场​​刺激对处于正常状态的现有骨组织的有效性较小，但它具有损伤后立即促进骨组织上的成骨的能力。在体外，似乎很难仅仅通过脉冲电磁场​​刺激来促进SV-HFO分化。目前，我们已经证实，当右美齿剂，1α25-二羟基毒性_3等都应用于SV-HFO时，并且正在调查电磁场刺激是否可以增强其差异化促进效应时，与这些分化促进性相结合时，将会增强其差异化效果。