家兎眼水晶体上皮細胞の創傷治癒過程におけるアポトーシスの発現

兔眼晶状体上皮细胞伤口愈合过程中凋亡的表达

• 批准号: 07771564
• 负责人: 加藤 克彦
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771564/
• 关键词: 水晶体上皮細胞; 創傷治癒; アポトーシス; 免疫組織化学; TUNEL法

1.目的:後発白内障は、その形成に術後水晶体嚢内に残存した水晶体上皮細胞の増殖・分化が関わっており、術後早期の水晶体上皮細胞の挙動を明らかにすることは後発白内障の発生を予防するうえで重要であるとともに創傷治癒過程の解明にも役立つ。一般に、創傷治癒においては、過剰な修復が行われた後に細胞の脱落が起こることが知られており、皮膚などではこの過程にアポトーシスが関わっているといわれている。そこで、水晶体摘出術後の創傷治癒過程においてアポトーシスが発現しているか否か、及びその発現の時期を検討した。2.方法:体重約2kgの白色家兎に対して水晶体摘出術を行った後、術後14日まで細隙灯顕微鏡による観察と写真撮影を行うとともに経時的に眼球を摘出し、パラフィン切片を作成した。通常の光顕的観察を行うとともにTUNEL法(TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling)によりアポトーシスの発現の有無を観察した。3.結果:術後8〜9日目には、前嚢切開縁から後嚢中央側へ発展していた細胞の脱落が観察され、同部位にTUNEL陽性細胞が観察された。また、前嚢切開縁付近の前・後嚢接着部付近には5日目以降に紡錘形の細胞が出現し、この中にTUNEL陽性細胞が散見された。この部位の陽性細胞は7〜10日目までに比較的多く存在し、14日目にはほとんど観察されなかった。4.結論:水晶体上皮細胞の創傷治癒過程においてもアポトーシスが関与しているものと思われた。また、家兎眼では、過剰な増殖の後のアポトーシスは主として術後7〜10日目に生じているものと推察された。現在電顕によるアポトーシスの証明を行っているところである。

1.目的：继发性白内障的形成与术后晶状体囊内残留的晶状体上皮细胞的增殖和分化有关，阐明术后早期晶状体上皮细胞的行为有助于预防继发性白内障的发生。这对于预防很重要，也有助于阐明伤口愈合过程。众所周知，在伤口愈合过程中，细胞在过度修复后脱落，据说细胞凋亡参与了皮肤的这一过程。因此，我们研究了晶状体摘除后伤口愈​​合过程中是否发生细胞凋亡及其发生时间。 2.方法：对体重约2kg的白兔进行晶状体摘除后，使用裂隙灯显微镜进行观察和摄影直至术后14天，随着时间的推移摘除眼球并制作石蜡切片。除了常规的光学显微镜观察之外，还使用TUNEL方法（TdT介导的dUTP-生物素缺口末端标记）观察细胞凋亡的存在或不存在。 3.结果：术后第8天至第9天，观察到从前囊膜切口边缘发育至后囊膜中心的细胞脱落，并在同一部位观察到TUNEL阳性细胞。此外，第5天后，在前囊切口边缘附近的前后囊附着点附近出现了梭形细胞，并且到处都发现了TUNEL阳性细胞。第7-10天该部位出现较多阳性细胞，第14天几乎没有观察到阳性细胞。 4.结论：细胞凋亡似乎参与了晶状体上皮细胞的伤口愈合过程。另外，在兔眼中，推测过度增殖后的细胞凋亡主要发生在术后第7天至第10天。我们目前正在使用电子显微镜证明细胞凋亡。