Marfan症候群の遺伝子変異の解明

马凡综合征基因突变的阐明

基本信息

批准号：
06770591
负责人：
山岸敬幸
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770591/
关键词：

项目摘要

1)臨床症状の検討:当院心臓外来で経過観察中のMarfan症候群患者15例(男6例、女9例、年齢3-24才)について、臨床症状を以下の点を中心に調査した;身長、体重、アームスパン、蜘蛛指、wrist sign、thumb sign、脊柱側弯、胸郭変形、水晶体亜脱臼、心血管疾患、気胸、鼠径ヘルニア、その他の奇形。主な結果は以下の通りである;全例でアームスパンは身長より長く、脊柱側弯または胸郭変形を認めたが、その程度は様々だった。水晶体亜脱臼は9例(60%)に認められた。心血管疾患は僧帽弁逸脱10例、僧帽弁閉鎖不全8例、大動脈弁閉鎖不全3例、大動脈拡張9例だった。気胸を4例、鼠径ヘルニアを2例で認めた。この結果は本研究の基礎的データとなる。2)遺伝子変異の解析:上記15例中6例の末梢血単核球からDNAを抽出した。そのうち3例について、2つのアプローチで遺伝子解析を行った。(1)遺伝子部分欠失、部分重複といった比較的大きな変異を検出するために、fibrillin遺伝子cDNAをプローブにして、長いDNA断片の分解能を高めるために独自に考案した。“一本鎖DNA電気泳動法"を応用したサザンブロット解析を行なった。(2)点突然変異のような微小な異常を検出するために、患者遺伝子を部分的にPCR法で増幅し、SSCP法でスクリーニングした。まだ巨大なfibrillin遺伝子の全領域を解析できていないため、現在までのところ遺伝子変異は検出されていないが、遺伝子全領域にわたる解析が行われれば、何らかの遺伝子変異が検出できると考えられる。今後残る領域の解析を進めていくとともに、すでにDNAを抽出した3例、およびその他の9例についても同様の解析を行っていく計画である。

1）临床症状检查：对我院心脏门诊随访的15例马凡综合征患者（男6例，女9例，年龄3～24岁）的临床症状进行调查，重点检查以下内容要点；身高、体重、臂展、蜘蛛指、腕征、拇指征、脊柱侧弯、胸廓畸形、晶状体半脱位、心血管疾病、气胸、腹股沟疝气等畸形。主要结果如下：所有病例的臂展均大于身高，并且观察到脊柱侧弯或胸部畸形，但程度各异。 9例（60%）出现晶状体半脱位。心血管疾病包括二尖瓣脱垂10例，二尖瓣关闭不全8例，主动脉关闭不全3例，主动脉扩张9例。气胸4例，腹股沟疝2例。该结果将作为本研究的基础数据。 2)基因突变分析：对上述15例中的6例的外周血单个核细胞提取DNA。使用两种方法对其中三个病例进行遗传分析。 (1)为了检测部分基因缺失和部分重复等相对较大的突变，我们开发了一种独特的方法，以原纤维蛋白基因cDNA为探针，提高长DNA片段的分辨率。使用“单链DNA电泳”进行Southern印迹分析。 (2)为了检测点突变等微小异常，通过PCR对患者基因进行部分扩增，并通过SSCP进行筛查。由于尚未分析巨型原纤维蛋白基因的整个区域，因此目前尚未检测到基因突变，但据认为，如果分析该基因的整个区域，将能够检测到一些基因突变。除了继续分析其余区域外，我们计划对已提取DNA的三例和其他九例进行类似的分析。