ニンジン不定胚の形状解析による染色体数異常の推定

通过胡萝卜体细胞胚胎形状分析估计染色体数目异常

• 批准号: 06760228
• 负责人: 荊木 康臣
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06760228/
• 关键词: 種苗生産; 不定胚形成; 異数体

本研究は、種苗生産に不定胚形成を応用するため、優良不定胚の判定にその形状を利用することの可能性を探る目的で、不定胚の染色体数をその形状の関係を調べた。実験材料としてはニンジンの不定胚を用いた。まず、ニンジン魚雷型胚の形状による詳細な分類を行い、次にニンジン魚雷型胚の染色体を観察する方法の確立を図った。具体的には、ニンジンの魚雷型胚をCotyledonary part(将来子葉になる部分)の形状によって、6種類に分類し、発芽用培地に移植した後の生育を調べた。その結果、多くのものは、形に関係なく小植物体へと発育するが、実生と同様な過程を経て正常に小植物体へと発育したものはかなり少なく、それらは特定の形状のものであった。この結果は優良不定胚の判定に不定胚の形状を利用することの可能性を示唆するものである。次にニンジンの魚雷型胚の染色体を観察する方法を確立するために、細胞分裂の同調を図るための処理や細胞壁の影響をなくすための処理、また染色方法などの最適条件を調べた。その結果、コルヒチン(0.05%水溶液)処理3時間、酵素(ペクトリアーゼY-23、セルラーゼY-C)処理1時間、酢酸オルセインによる染色(染色時間30分)でニンジンの魚雷型胚の染色体観察が可能であった。不定胚の形状とその染色体数の関係については、時間の関係で多数の不定胚を観察できなかっため、はっきりとした関係を明らかにすることはできなかった。しかしながら、染色体が観察できた不定胚のほとんどは2倍体(n=18)で、異数体としては3倍体のものが若干観察され、それらの胚はroot partが2つに分かれたものなど明らかな奇形であった。今後は、今回確立した分類法および染色体観察法を利用し、より多くの不定胚を観察し、不定胚の形状と染色体数の関係を詳細に調べる必要がある。

为了将无定形胚胎形成用于种子生产，这项研究研究了无限期胚胎染色体数量的关系，目的是探索使用其形状来确定最佳和最不确定的胚胎的可能性。作为实验材料，使用了无定形胡萝卜胚。首先，我们基于胡萝卜型胚胎的形状进行了详细的分类，然后我们建立了一种观察胡萝卜鱼雷型胚胎染色体的方法。具体而言，基于子叶叶片的形状（将来将成为子叶的部分），将胡萝卜鱼形胚胎分为六种类型，并检查了发芽培养基中植入后的生长。结果，许多人无论其形状如何发展成植物体，但是很少有人通过与幼苗相似的过程成功地发展为植物体，并且具有特定的形状。该结果表明有可能使用未定义的胚胎的形状来确定最佳和最不确定的胚胎。接下来，为了建立一种观察胡萝卜鱼皮胚胎染色体的方法，我们研究了最佳条件，例如治疗以同步细胞分裂，消除细胞壁效应的处理和染色方法。结果，通过处理秋水仙碱（0.05％水溶液）3小时，可以对胡萝卜鱼形胚胎观察染色体观察，处理酶（pectryase Y-23，纤维素酶Y-C），持续1小时，用醋酸甲酸奥尔赛蛋白（固定时间30分钟）染色。至于无限胚胎的形状与其染色体数之间的关系，我们无法澄清明确的关系，因为由于时间限制，我们无法观察到大量不确定的胚胎。然而，大多数观察到染色体的无定形胚胎是二倍体（n = 18），一些非代酶是三倍体的，并且这些胚胎明显畸形，两个根部分分为两部分。将来，有必要使用新建立的分类法和染色体观察方法来观察更多无限的胚胎，并详细研究不确定的胚胎的形状与染色体数量之间的关系。