光学的測定法による発生初期胚上頚神経節におけるシナプス機能の形成過程に関する研究

光学测量方法研究早期胚胎颈上神经节突触功能形成过程

基本信息

批准号：
06780670
负责人：
佐藤容子
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06780670/
关键词：
光学的測定方上頚神経節シナプス機能形成

项目摘要

本研究では、シナプス回路を形成する最も単純な神経細胞群のモデルとして鶏胚上頚神経節をとり上げ、神経節内におけるシナプス伝達機能の初期形成過程について解析を行った。孵卵6-12日の鶏胚上頚神経節を、膜電位感受性色素(NK2761)で染色し、神経節へ向かう神経線維束の電流刺激に対するニューロン応答を、光学的多部位同時測定システムを用いて127ヶ所から同時に記録することに成功した。電流刺激によって誘発される光学的シグナルは、スパイク状の相とそれに続く時間経過のゆっくりした相の二相性の成分から成る形状を示した。0.1Hzの連続刺激によって、第一相は殆ど変化しないが、第二相は指数関数的に減衰した。さらに、第二相は低Ca^<2+>液やd-tubocuranineで抑制された。このことから、第一相はpre-synapticなシグナルで、第二相はcholinergicなシナプス伝達を介したpost-synapticなシグナルであることが同定された。神経節にはいる二つの節前神経線維束(N.caroticus cervicalis,N.vertebralis)の刺激によるニューロン応答の空間的パターンの違いから、神経節内部でのシナプス結合の空間的分析パターンを明らかにした。個体発生の進行にともなうシナプス結合の発達を追跡し、そのマッピングを行った。明確なpost-synaptic responseは孵卵6日の神経節では観察されず、孵卵7日以降の神経節で発現し、post-synaptic responseの大きさとその発現領域は個体発生の進行にともなって発達してゆくのが見られた。

本研究以鸡胚颈上神经节作为形成突触回路的最简单的神经元群模型，分析了神经节内突触传递功能的初始形成过程。孵化第6-12天的鸡胚颈上神经节用膜电压敏感染料（NK2761）染色，并使用光学多位点同时测量神经元对神经纤维束电流刺激对神经节的反应。他们成功地同时记录了 127 个位置的数据。电流刺激引起的光信号表现出双相形状，由尖峰状阶段和缓慢的时程阶段组成。 0.1 Hz 的连续刺激在第一阶段几乎没有变化，但第二阶段呈指数衰减。此外，第二相被低Ca 2+ 溶液和d-筒库拉宁抑制。由此可知，第一相是突触前信号，第二相是胆碱能突触传递介导的突触后信号。神经节内突触连接的空间模式是通过刺激进入神经节的两个节前神经纤维束（颈神经、椎神经）时神经元反应的空间模式的差异来揭示的。随着个体发育的进展，我们跟踪并绘制了突触连接的发展情况。在培养第6天的神经节中没有观察到明显的突触后反应，但在培养第7天后在神经节中表达，并且突触后反应的幅度及其表达区域随着个体发育的进展而发展。我可以看到它的进展。