病的活性化好中球に起因する内皮細胞の機能・形態変化から見た多臓器不全症の病態解析

从病理激活的中性粒细胞引起的内皮细胞功能和形态变化角度分析多器官功能障碍

• 批准号: 06770946
• 负责人: 藤 洋吐
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: University of Occupational and Environmental Health, Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770946/
• 关键词: MOF; 多臓器不全症; 好中球; 血管内皮

外科手術後の腹腔内感染症などに起因する多臓器不全は、重篤な転帰をもたらす事より、病態成立の機序解明が急務となっている。今回我々は、ET血症の中でも特に激しい炎症細胞浸潤伴い、高率に多臓器障害を来す事で知られるrabbit Shwartzman反応を作製し、臓器傷害機序解明を試みた。1)0.04mg/kgのLPSを36h間隔で2回静注し、Rabbit前身性Shwartzman反応を作製した。各時相において(1)肝臓・肺臓の組織所見、分離した好中球の (2)血管内皮細胞への接着能 (3)好中球の表面抗原(CD11a,b,CD18)発現 (4)組織血管内皮の表面抗原(ICAM-1)発現をフローサイトメトリー、及び免疫組織染色にて測定し、ET1回投与(E1)群と2回投与(E2)群との相違を解析した。2)さらに好中球の接着抗原CD11bに対するモノクローナル抗体(MAb)M1/70を2mg/kg2回目のLPS投与10分前に静注し、このMAb投与群とShwartzman反応群との組織所見・各好中球機能を比較した。1)LPS1回投与3h後肝肺各臓器に好中球主体の炎症細胞浸潤を認め、24h後には消失した。LPS2回投与3h後ではさらに多量の好中球の集積を認め、24h後には著名な出血壊死が出現した。2)好中球の血管内皮細胞に対する接着能は、E1群182+60%,E2群295+74%とE2群で著名に亢進していた。3)好中球表面の接着抗原CD11a,CD11b,CD18の発現量はE1群E2群共に高値を示した。4)組織血管内皮のICAM-1発現はE1群E2群共に増強していた。5)抗CD11bMAb投与により、臓器への好中球の集積・出血壊死いずれも阻止された。MAb投与群における好中球の接着能は178+29%とE1軍のレベルまで抑制された。今回の実験では、E2群において好中球は血管内皮接着能が有意に増強していた。この好中球は接着分子Mac-1が、血管内皮はICAM-1がそれぞれ発現の増強を認めた。そこでM1/70を用いて接着能を特異的に抑制すると組織傷害が阻止できた。すなわち、Shwartzman反応においては好中球・血管内皮の過剰な接着が、好中球の病巣への遊走を防げ、正常組織を傷害している可能性が示唆された。

术后腹腔感染引起的多器官功能衰竭后果严重，迫切需要阐明其发病机制。在这项研究中，我们试图通过产生兔施瓦兹曼反应来阐明器官损伤的机制，众所周知，由于ET血症中炎症细胞浸润特别强烈，该反应会导致高比例的多器官损伤。 1)以0.04mg/kg的LPS静脉注射两次，间隔36小时，产生兔前体Shwartzman反应。在每个时间阶段，（1）肝脏和肺部的组织学检查结果，（2）分离的中性粒细胞与血管内皮细胞的粘附能力，（3）中性粒细胞表面抗原（CD11a，b，CD18）的表达，以及（4）表达通过流式细胞术和免疫组织学染色测定组织血管内皮表面抗原（ICAM-1）的含量，并分析1次ET给药（E1）组和2次ET给药（E2）组之间的差异。 2)另外，在第二次LPS给药前10分钟，以2mg/kg静脉注射抗中性粒细胞粘附抗原CD11b的单克隆抗体(MAb)M1/70，并确定MAb给药组和MAb给药组之间的组织学结果和各种偏好。进行Shwartzman反应组的中粒球功能比较。 1)给予1次LPS后3小时，在肝脏、肺和其他器官中观察到炎症细胞浸润，主要是中性粒细胞，24小时后消失。第二次给予LPS后3小时，大量中性粒细胞聚集，24小时后出现明显出血性坏死。 2)E2组中性粒细胞与血管内皮细胞的粘附能力显着增强，E1组为182+60%，E2组为295+74%。 3)E1、E2组中性粒细胞表面粘附抗原CD11a、CD11b、CD18表达量均较高。 4)E1组和E2组组织血管内皮中ICAM-1表达均增强。 5)施用抗CD11b MAb可防止器官中中性粒细胞积聚和出血性坏死。 MAb给药组中的中性粒细胞的粘附能力被抑制至178±29%，即E1组的水平。本实验中，E2组中性粒细胞血管内皮粘附能力明显增强。观察到中性粒细胞中粘附分子 Mac-1 和血管内皮细胞中 ICAM-1 的表达增强。因此，当使用M1/70专门抑制粘附能力时，可以防止组织损伤。换句话说，有人提出，在Shwartzman反应中，中性粒细胞与血管内皮之间的过度粘附可能会阻止中性粒细胞迁移到病变处并损害正常组织。