義歯症に付着するカンジダによる炎症性サイトカイン誘導と義歯性線維症

假牙粘附念珠菌诱导炎症细胞因子和假牙相关纤维化

基本信息

批准号：
05771708
负责人：
田中秀明
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Kagoshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

表記研究の出発点である「義歯床粘膜面に付着・増殖したCandida albicansが局所で炎症性サイトカイン産生を誘導して,義歯性口内炎発症に係わるのではないか」との作業仮説を検証するための最初のステップとして,鹿児島大学歯学部口腔細菌学教室に保存されたC.albicans菌株のなかから3135(血清型A),1001および3(いずれも血清型不明)を選びそれらの酵母型菌体と3135株の細胞壁画分のサイトカイン誘導作用を検討した。供試菌株はサブロ-培地で培養し,ステ-ショナルフェースの菌を集菌した。細胞壁は凍結乾燥菌体をガラスビーズで破砕して調製した。in vivo実験は,C3H/HeNマウスに予めMDP(細菌細胞壁ペプチドグリカンの生物活性を担う合成標品でマウスのサイトカイン誘導物質に対する反応性を高める作用がある)100mugを静注し,4時間後に3135株の菌体ならびに細胞壁画分各500mugを静注し,その90分後の血清中のサイトカイン活性を測定した。in vitro実験は,健康成人の末梢全血培養にテスト標品(100-0.1mug/ml)を添加し,24時間後の培養上清中のサイトカイン活性を測定した。腫瘍壊死因子(TNF)活性はアクチノマイシンD処理したL929細胞に対する殺作用を,インターロイキン(IL)-6活性はMH60.BSF2細胞増殖刺激作用をそれぞれ指標にして測定した。その結果,3135株菌体はマウス血清中にIL-6活性を誘導したが,明確なTNF誘導活性は示さなかった。なお同菌の細胞壁画分を注射されたマウスはアナフィラキシ-様反応を示し,全例1時間以内に死亡した。従って,血清サイトカインは測定できなかった。ヒト全血培養系では供試3菌体ならびに細胞壁画分の何れもがIL-6ならびにTNF活性を誘導した。なかでも細胞壁画分の活性が最も強かった。今後,細胞壁画分の活性構造を追究すると共に,ヒト口腔粘膜の上皮細胞や線維芽細胞培養でのサイトカイン誘導作用等についても検討したいと考えている。

As the first step to verifying the working hypothesis that "candida albicans, which adhered and grown on the mucosa surface of the denture bed, locally induces inflammatory cytokine production and is involved in the onset of denture stomatitis," we selected 3135 (serotype A), 1001 and 3 (both unknown serotypes) from the C. albicans strains preserved in the Department of Oral Bacteriology, Kagoshima University牙科学院，检查了这些酵母类型细胞的细胞因子诱导作用和3135菌株的细胞壁部分。在SABO中培养了测试菌株，并收集了固定面的细菌。通过用玻璃珠破坏冻干细菌来制备细胞壁。在体内实验中，100mug的MDP（一种负责细菌细胞壁肽甘氨酸的生物学活性的合成制剂，具有增加小鼠对细胞因子诱导剂的反应性的作用），将静脉注射到C3H/HEN小鼠中，并注射到每种细胞和500mug的31355555555555555555555555。 90分钟后测量血清中的细胞因子活性。在体外实验中，将测试标本（100-0.1mug/ml）添加到健康成年人的周围全血培养物中，并在24小时后测量培养上清液中的细胞因子活性。通过对放线菌素D处理的L929细胞的杀伤作用测量肿瘤坏死因子（TNF）活性，并分别通过MH60.BSF2细胞增殖的刺激作用来测量白介素（IL）-6活性。结果表明，3135个应变细胞在小鼠血清中诱导IL-6活性，但没有明显的TNF诱导活性。注射相同细菌的细胞壁画的小鼠显示出类似过敏反应的反应，所有病例在1小时内死亡。因此，无法测量血清细胞因子。在人类的全血培养系统中，三个细胞和细胞壁部分都诱导IL-6和TNF活性。其中，细胞壁分数是最强的活性。将来，我们希望研究细胞壁馏分的活性结构，以及人口服粘膜的上皮细胞和成纤维细胞培养物的细胞因子诱导作用。