白血病・前白血病細胞の増殖機構と抗腫瘍剤およびサイトカインによるその制御の研究

白血病/白血病前期细胞增殖机制及其抗肿瘤药物和细胞因子调控的研究

• 批准号: 05770800
• 负责人: 通山 薫
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: 福井医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 1994
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770800/
• 关键词: 骨髄異形成症候群; CD34陽性細胞; コロニー刺激因子; 白血病移行; 増殖因子依存性細胞株; N-ras点突然変異; 骨髄異形成症候群; CD34陽性細胞; コロニー刺激因子; 白血病移行; 増殖因子依存性細胞株; N-ras点突然変異

前白血病状態と考えられている骨髄異形成症候群(MDS)に対するサイトカイン療法の有効性と安全性を調べるために以下の実験を行なった。即ちMDS患者19例(低リスクMDS群8例,高リスクMDS群6例,白血病移行群5例)および健常者4例の骨髄(一部末梢血)細胞から、免疫磁性ビーズ法にてCD34陽性分画を分離してG-CSFまたはGM-CSF存在下に7日間液体培養後、芽球の動態をインビトロで観察した。その結果各群ともCSF存在下で細胞数が増加したが、健常者群で芽球割合が低下して順調に分化成熟していったのに対して、MDS各群、とくにリスクの高い群では芽球がCSFによって著増した2例を含めて、芽球の残存傾向が見られた。培養前後に核型分析を施行し得た4例のMDSでは、異常核型のクローンがインビトロでCSFによって支持されていた。従ってとくに芽球割合の多い病型では、CSFによってさらに芽球の増加をきたす可能性が考えられた。次にMDS細胞の長期培養に取り組み、長期培養細胞株が得られたので報告する。患者は、RARSの52歳男性で、白血病化をみることなく出血傾向にて死亡した。生前の患者骨髄よりIL-3依存性細胞株MDS92が樹立された。MDS92は現在まで19カ月にわたって継代されている。形態上は芽球様細胞から成熟好中球・単球様細胞まで混在しており、IL-3、GM-CSFまたはSteel factor存在下で増殖し、種々のミエロイドコロニーを形成した。核型分析の結果、クローナルに5番,7番染色体の欠先を含む複雑な異常を認め、またN-ras遺伝子解析にてコドン12にGGT→GCTの点突然変異が検出された。以上よりMDS92は前白血病状態の特徴を反映するユニークな細胞株と考えられ、今後本細胞株用いて分子・細胞生物学的解析を予定している。

进行了以下实验，以研究细胞因子疗法对骨髓增生综合征（MDS）的疗效和安全性，该综合征被认为是一种蛋白酶状态。也就是说，从19例MDS患者的骨髓（部分外周血）细胞（低风险MDS组中有8例，高危MDS组中的6例，白血病过渡组中的6例）和4例健康患者使用液体培养在GM-CSF的情况下，从而在GM-CSF的情况下进行了7日，将CD34阳性分数分离出来。结果，在每组CSF存在下，细胞的数量增加，但是健康组的爆炸率降低，分化和成熟稳步发生，而在每组MD，尤其是在高风险组中，由于CSF造成的爆炸率显着增加。在能够在培养前后进行核型分析的四个MDS中，CSF在体外支持异常的核型克隆。因此，认为CSF可能导致爆炸进一步增加，尤其是在爆炸率高的疾病类型中。接下来，我们将报告MDS细胞的长期培养，并获得了长期培养的细胞系。该患者是一名52岁的男人，患有RARS，死于没有白血病的流血趋势。 IL-3依赖性细胞系MDS92是从患者一生的骨髓中建立的。 MDS92迄今已被传递了19个月。从形态上讲，将细胞从类囊体细胞与成熟的嗜中性粒细胞和单核细胞混合，并在IL-3，GM-CSF或钢因子存在下生长，形成各种髓样菌落。核型分析表明，通过N-RAS基因分析检测到了克隆中染色体5和7缺乏的复杂异常，从GGT到GCT的点突变。基于上述，MDS92被认为是反映proukemia态特征的独特细胞系，将来将使用该细胞系在将来进行分子和细胞生物学分析。