ヒト血小板チロシンリン酸化蛋白質p120の同定と血小板活性化反応との関連

人血小板酪氨酸磷酸化蛋白p120的鉴定及其与血小板活化反应的关系

• 批准号: 05770801
• 负责人: 矢冨 裕
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: 山梨医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770801/
• 关键词: 蛋白質チロシンリン酸化反応; 血小板; rasGAP; pp125FAK

本研究においては,血小板機能発現における重要な関与が示唆されている蛋白質チロシンリン酸化反応の中で,特に分子量約120kのチロシンリン酸化蛋白質(p120)の同定を中心に検討する予定であった。研究計画調書(研究計画・方法)に記したように,まず抗rasGAP抗体による免疫沈降の系の確立に努めたが,残念ながら達成されなかった。その間に,Brugge等のグループにより血小板pp125FAKの報告がなされた。それと我々の蛋白質チロシンリン酸化反応のデータとの比較検討により,p120が(少なくともその一部は)pp125FAKであることは間違いないと判断された(ウエスタン・ブロッティングによる追試を施行した)。最近,このpp125FAKとインテグリン・細胞骨格との有機的関連について,多くの細胞系において注目かつ研究されている。細胞骨格の変動が,凝集反応という生理的機能発現と一体となってダイナミックにとらえることが可能な血小板の系においては,いっそう興味深いテーマと考えられる。本研究の将来的な発展についても,pp125FAKと血小板凝集反応の機能的関連ということを考慮している。以上のように,本研究は当初の計画通りには進展しなかったわけであるが,研究遂行のための,血小板蛋白質チロシンリン酸化反応の詳細な検討,イノシトールリン脂質との関連の検討を通じて,次記の研究発表を行うことができ,非常に有意義なものとすることができたと考えられる。

在这项研究中，我们计划重点鉴定酪氨酸磷酸化蛋白（p120），其分子量约为120k，在蛋白质酪氨酸磷酸化反应中被认为对血小板功能的表达很重要。正如研究计划文件（研究计划/方法）中所述，我们首先尝试使用抗rasGAP抗体建立免疫沉淀系统，但遗憾的是并未实现。与此同时，Brugge等人的研究小组报道了血小板pp125FAK。通过将其与我们的蛋白质酪氨酸磷酸化数据进行比较，确定 p120（至少部分）肯定是 pp125FAK（使用蛋白质印迹进行了额外的测试）。近年来，pp125FAK与整合素/细胞骨架之间的有机关系引起了许多细胞系统的关注和研究。这被认为是血小板系统中一个更有趣的话题，其中细胞骨架的变化可以结合聚集生理功能的表达来动态捕获。本研究的未来发展还考虑了pp125FAK与血小板聚集之间的功能关系。如上所述，这项研究并没有按原计划进行，但通过详细检查血小板蛋白酪氨酸磷酸化及其与肌醇磷脂的关系，我们能够：我们相信我们能够做出非常有意义的研究报告。

项目成果

Yatomi,Y.,Ozaki,Y.,Koike,Y.,Satoh,K.,and Kume,S.: "Wheat germ agglutinin-enduced intracellular calcium mobilization in human platelets:suppression by staurosporine and resistance to cyclic AMP inhibition." Biochem.Biophys.Res.Commun.191. 453-458 (1993)

Yatomi,Y.、Ozaki,Y.、Koike,Y.、Satoh,K. 和 Kume,S.：“小麦胚芽凝集素诱导的人血小板细胞内钙动员：十字孢菌素的抑制和对环 AMP 抑制的抵抗。”

Yatomi,Y.,Ozaki,Y.,Satoh,K.,and Kume,S.: "Anti-CD9 monoclonal antibody elicits staurosporine inhibitable phosphatidylionsitol 4,5,-bisphosphate hydrolysis,phosphatidylinositol 3,4,-bisphosphate synthesis, and protein-tyrosin phosphorylation in human plael

Yatomi,Y.、Ozaki,Y.、Satoh,K. 和 Kume,S.：“抗 CD9 单克隆抗体引发十字孢菌素抑制的磷脂酰肌醇 4,5,-二磷酸水解、磷脂酰肌醇 3,4,-二磷酸合成和蛋白质