P-糖蛋白質の正常機能解析と誘導発現機構解析に基づいた多剤耐性克服法の開発

基于P-糖蛋白正常功能分析和诱导表达机制分析，开发克服多药耐药性的方法

基本信息

批准号：
05152066
负责人：
植田和光
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、P糖蛋白質の生理的機能、P糖蛋白質の薬剤輸送機構、癌細胞におけるP糖蛋白質の発現誘導のメカニズムなどを明らかにすることによって、多剤耐性を克服するより有効な方法を開発することを目的として行なった。P糖蛋白質の生理機能ヒトP糖蛋白質が頂側膜特異的に極性発現した上皮性培養細胞を用いた経細胞輸送測定系によって、P糖蛋白質が副腎皮質ホルモンのコルチゾール、アルドステロンおよび人工ステロイドであるデキサメサゾン以外に、妊娠中に大量に分泌されるエストリオールがP糖蛋白質によって輸送されることが明かになった。また摘出腎潅流法によって、腎からの強心肺糖体ジゴキシン排泄のシクロスポリンによる抑制が、P糖蛋白質を介していることが明かになり、副腎、妊娠中の胎盤、腎臓におけるP糖蛋白質の物質輸送トランスポータとして重要な生理機能が示唆された。P糖蛋白質阻害剤の作用機構経細胞輸送系によって、ベラパミル、アジドピンなどの耐性克服剤が、P糖蛋白質によって輸送されること、また最近耐性克服剤としても注目されている免疫抑制剤シクロスポリンA、FK506も輸送されることが明かとなった。ベラパミル、シクロスポリンAの経細胞輸送を速度論的に解析した結果、P糖蛋白質による経細胞輸送は典形的な酵素反応論的曲線となった。以上の結果は、これらの阻害剤は基質のP糖蛋白質への結合を阻害しているだけでなく、それら自身P糖蛋白質による能動輸送の基質であり、輸送過程全体を競合阻害していることを示唆している。P糖蛋白質の発現誘導のメカニズムがん抑制遺伝子p53によるP糖蛋白質遺伝子の発現制御をさらに検討した結果、p53による調節は、P糖蛋白質遺伝子の必須プロモーター領域を介して行なわれていることが明らかとなった。

进行这项研究的目的是开发一种更有效的方法来克服多药耐药性，通过澄清P-糖蛋白的生理功能，P-糖蛋白的药物转运机制以及诱导P-糖蛋白在癌细胞中诱导P-糖蛋白表达的机制。 Physiological Function of P-glycoprotein A transcellular transport assay system using epithelial cultured cells in which human P-glycoproteins are specifically expressed in polarity in apical membranes revealed that in addition to the adrenal corticosterone cortisol, aldosterone and the artificial steroid dexamethasone, estriol, which is secreted in large quantities during pregnancy, is transported by P-糖蛋白。此外，通过切除肾脏灌注，揭示了环孢素抑制通过P-糖蛋白从肾脏中抑制肾脏中的心肺糖苷地高辛排泄，这表明在怀孕期间，肾上腺placenta和sidgey andney和sidgey sedney和sidgey sedney和sidgey sedney plactena和sidgey sedney和sidgney plastnea。 p-糖蛋白抑制剂的机制已经表明，经细胞运输系统通过P-糖蛋白运输诸如Verapamil和Azidopine之类的耐药性剂，以及免疫抑制剂环孢子蛋白A和FK506最近引起了阻力为抗性的型机构，这些蛋白A和FK506最近引起了人们的注意。维拉帕米和环孢菌素A的跨细胞转运的动力学分析表明，P-糖蛋白的跨细胞转运成为典型的酶促反应性曲线。以上结果表明，不仅抑制底物与p糖蛋白的结合，而且它们本身是通过P-糖蛋白主动运输的底物，并且它们竞争抑制整个运输过程。 P-糖蛋白表达诱导的机理在通过癌症抑制剂基因p53对P-糖蛋白基因的表达控制进行进一步研究后，已经揭示了p53的调节，通过P-糖蛋白基因的基本启动子区域进行了p53的调节。