P-糖蛋白質の正常機能解析と誘導発現機構解析に基づいた多剤耐性克服法の開発

基于P-糖蛋白正常功能分析和诱导表达机制分析，开发克服多药耐药性的方法

基本信息

批准号：
05152066
负责人：
植田和光
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、P糖蛋白質の生理的機能、P糖蛋白質の薬剤輸送機構、癌細胞におけるP糖蛋白質の発現誘導のメカニズムなどを明らかにすることによって、多剤耐性を克服するより有効な方法を開発することを目的として行なった。P糖蛋白質の生理機能ヒトP糖蛋白質が頂側膜特異的に極性発現した上皮性培養細胞を用いた経細胞輸送測定系によって、P糖蛋白質が副腎皮質ホルモンのコルチゾール、アルドステロンおよび人工ステロイドであるデキサメサゾン以外に、妊娠中に大量に分泌されるエストリオールがP糖蛋白質によって輸送されることが明かになった。また摘出腎潅流法によって、腎からの強心肺糖体ジゴキシン排泄のシクロスポリンによる抑制が、P糖蛋白質を介していることが明かになり、副腎、妊娠中の胎盤、腎臓におけるP糖蛋白質の物質輸送トランスポータとして重要な生理機能が示唆された。P糖蛋白質阻害剤の作用機構経細胞輸送系によって、ベラパミル、アジドピンなどの耐性克服剤が、P糖蛋白質によって輸送されること、また最近耐性克服剤としても注目されている免疫抑制剤シクロスポリンA、FK506も輸送されることが明かとなった。ベラパミル、シクロスポリンAの経細胞輸送を速度論的に解析した結果、P糖蛋白質による経細胞輸送は典形的な酵素反応論的曲線となった。以上の結果は、これらの阻害剤は基質のP糖蛋白質への結合を阻害しているだけでなく、それら自身P糖蛋白質による能動輸送の基質であり、輸送過程全体を競合阻害していることを示唆している。P糖蛋白質の発現誘導のメカニズムがん抑制遺伝子p53によるP糖蛋白質遺伝子の発現制御をさらに検討した結果、p53による調節は、P糖蛋白質遺伝子の必須プロモーター領域を介して行なわれていることが明らかとなった。

本研究旨在通过阐明P-糖蛋白的生理功能、P-糖蛋白的药物转运机制以及诱导癌细胞中P-糖蛋白表达的机制，寻找更有效的方法来克服多药耐药性。发展的目的。 P-糖蛋白的生理功能使用培养的上皮细胞的转胞转运测量系统，其中人P-糖蛋白被极化并在顶膜中特异性表达，表明P-糖蛋白是肾上腺皮质激素皮质醇、醛固酮和人工类固醇的激素。除地塞米松外，已发现妊娠期间大量分泌的雌三醇也是通过P-糖蛋白转运的。此外，通过离体肾脏灌注，揭示了环孢素抑制心肺苷地高辛通过P-糖蛋白从肾脏的排泄，以及P-糖蛋白在妊娠期间的肾上腺、胎盘和肾脏中的转运具有重要的生理功能。建议作为运输者。 P-糖蛋白抑制剂的作用机制：维拉帕米、叠氮平等耐药克服剂是由P-糖蛋白通过转胞转运系统转运的，而最近作为耐药克服剂而受到关注的免疫抑制剂环孢菌素A，它具有据透露，FK506也将被运输。维拉帕米和环孢菌素 A 转胞吞作用的动力学分析表明，P-糖蛋白的转胞吞作用遵循典型的酶促曲线。上述结果表明，这些抑制剂不仅抑制底物与P-糖蛋白的结合，而且它们本身也是P-糖蛋白主动转运的底物，并且竞争性地抑制整个转运过程。 P-糖蛋白表达的诱导机制对抑癌基因p53对P-糖蛋白基因表达的调节的进一步研究表明，p53的调节是通过P-糖蛋白基因的必需启动子区域介导的。