膵臓細胞の産生する培養ニュ-ロンの生存を促進する因子

促进胰腺细胞产生的培养神经元存活的因素

• 批准号: 02670078
• 负责人: 長谷川 修司
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02670078/
• 关键词: 神経栄養因子; リンパ細胞; 培養神経細胞; 神経成長因子; Kー252a

目的 神経細胞が正常に機能するためには神経成長因子をはじめとする神経養因子が供給されることが必要であるが、これまでに同定された神経栄養因子は極めて少ない。神経系細胞の生存と分化に免疫系細胞が関与している例が最近報告されている。そこで脾臓レンパ細胞の条件培養液(CM)中に神経細胞の生存、維持を促進する活性があるか否か検討した。方法 ニワトリ脾臓リンパ細胞をコンカナバリンAを加え培養し、その上清をCMとした。ニワトリ胚交感神経節(SG)、副交感神経節(CG)及び後退神経節(DG)の細胞を96ーmultiwellにまき、CMあるいは神経成長因子(NGF)を含む上記培液中で培養した。結果と考察 SGニュ-ロンはNGFを加えずに培養すると48時間以内に死亡したが、加えると約50%が生存した。生存促進効果は用量依存的であった。CMの生存促進活性はNGFの作用を抑制するprotein kinase阻害剤Kー252aにより阻害されなかった。6ーチオグアニンによる阻害の程度もCMとNGFで異なった。一方、protein kinase Cの阻害剤Hー7はCMとNGFの効果を阻害しなかった。また、CMとNGFの生存促進効果は5'ーdeoxyー5'ーmethylthionadenosineおよびLiClにより同程度に阻害された。CMの生存促進活性は100℃、pH14及びpepsin処理により完全に失活した。CGとDGニュ-ロンの生存に対してもCMは弱い促進効果を示した。まとめ レクチンにより活性化された脾臓細胞はSG,CGおよびDGニュ-ロンの生存を促進する活性因子を産生する。生存促進因子とはNGFと異なる因子であり、NGFと異なる細胞内情報伝達機序でニュ-ロンの生存、維持に働く。

目的 为了使神经元正常发挥功能，需要提供包括神经生长因子在内的神经营养因子，但迄今为止已鉴定出的神经营养因子很少。最近报道了免疫系统细胞参与神经系统细胞的存活和分化的例子。因此，我们研究了脾淋巴细胞的条件培养基（CM）是否具有促进神经细胞存活和维持的活性。方法：用刀豆球蛋白A培养鸡脾淋巴细胞，上清液作为CM。将鸡胚交感神经节(SG)、副交感神经节(CG)和回缩神经节(DG)细胞接种在96孔多孔中并在上述含有CM或神经生长因子(NGF)的培养基中培养。结果与讨论 当SG神经元在不添加NGF的情况下培养时，它们在48小时内死亡，但当添加NGF时，大约50%存活。促存活效应是剂量依赖性的。 CM 的存活促进活性不受 K-252a 的抑制，K-252a 是一种抑制 NGF 作用的蛋白激酶抑制剂。 CM 和 NGF 之间 6-硫鸟嘌呤的抑制程度也不同。另一方面，蛋白激酶C抑制剂H-7不抑制CM和NGF的作用。此外，5'-脱氧-5'-甲硫腺苷和 LiCl 也以相同程度抑制 CM 和 NGF 的存活促进作用。在 100°C、pH 14 和胃蛋白酶处理下，CM 的存活促进活性完全失活。 CM对CG和DG神经元的存活也表现出微弱的促进作用。摘要 被凝集素激活的脾细胞产生促进 SG、CG 和 DG 神经元存活的活性因子。促存活因子是与NGF不同的因子，通过与NGF不同的细胞内信息转导机制来促进神经元的存活和维持。

项目成果

JinーJun Luo and Shuji Hasegawa: "Chick sympathetic neurons in culture respond differentially to nerve growth factor and conditioned medium from activated splenic lymphocytes" Neurosicience Research.

Jin-Jun Luo 和 Shuji Hasekawa：“培养中的鸡交感神经元对神经生长因子和来自激活的脾淋巴细胞的条件培养基的反应不同”神经科学研究。