バゾプレッシン産生細胞の複数支配に関する電顕免疫組織化学的研究

加压素产生细胞多重优势的电镜免疫组织化学研究

• 批准号: 01570019
• 负责人: 落合 英彦
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01570019/
• 关键词: バゾプレッシンニュ-ロン; カテコ-ルアミン性神経支配; ペプチド性神経支配; 電顕免疫組織化学; PAP法; 金コロイド法; 凍結超薄切片; ロ-ウィクリルK4M

ラット視床下部室傍核のバゾプレッシン(VP)ニュ-ロンに対する種々のニュ-ロンの神経支配について、電顕免疫組織化学的手法を用いて追究した。始めに、包埋前PAP法と包埋後金コロイド法の組み合わせによる二重免疫染色法を用いて、カテコ-ルアミン(CA)の合成酵素であるド-パミン-β-水酸化酵素様陽性神経終末およびフェニルエタノ-ルアミンメチル基転移酵素様陽性神経終末の夫々が、VPの担体蛋白であるニュ-ロフィジンII(NPII)様陽性ニュ-ロンにシナプス様結合しているのを証明し、CAニュ-ロンのうちのアドレナリンまたはノルアドレナリンニュ-ロンによるVPニュ-ロンの神経支配を電顕免疫組織化学的に明らかにした。また、同様の方法を用いて、ニュ-ロペプチドY様陽性神経終末および心房性ナトリウム利尿ペプチド様陽性神経終末が夫々、NPII様陽性ニュ-ロンにシナプス様結合している事も明らかにした。ところで、包埋前PAP法と包埋後金コロイド法に用いられる試料は、加熱重合を必要とするエポキシ樹脂包埋試料であり、加熱による種々の抗原性の失活から、金コロイド法により検出できる抗原の種類は極めて少ない。そこで次に、低温重合が可能な樹脂であるロ-ウィクリルK4Mの包埋試料を用い、エポキシ樹脂による包埋試料で検出不可能な抗原の検出を試み、コリン性シナプス膜蛋白の一つであるシナプトフィジンが、下垂体後葉のVP性神経終末内微小胞に存在することを明らかにした。更に、抗原性の保持に関して最も優れていると思われる凍結超薄切片の金コロイド法への応用について検討し、種々の抗原の検出が可能であることを確認した。今後、ロ-ウィクリルK4Mの包埋の超薄切片および凍結超薄切片を用い、金コロイド法による多重電顕免疫染色法を応用して、個々のVPニュ-ロンに対する多種のニュ-ロンによる同時神経支配について追究していく。

通过电子免疫原理化学方法，在下丘脑下丘脑下丘脑下丘脑下丘脑中的Ni-ron（VP）Ni-Ron。首先，使用内置PAP方法和载型多角形方法的双重免疫集染色方法，Ppamine-β-羟基阳性神经，这是一种合成的cateco-lureamin酶（CA）苯基乙醇素甲基甲基碱基旋转物质，阳性神经术语，证明Ni-Rofidin II（NPII）阳性NU-RON，VP的阳性NUICER，CA New-An-An-Manalin或Oradrenarine Ron的VP Niu-ron- ron- ron-ron-ron-ron-ron-ron-ron-ron-ron-ron-ron-ron-ron-ron-- Ron-Ron-Ron神经控制已揭示。使用相同的方法，还揭示了Ni- lopepetide y-sama样阳性神经末端和心房尿液肽阳性神经阳性神经和NPII阳性NU-RON的阳性神经端。顺便说一句，在构建的-In PAP方法中使用的样品和刷后的金色结石方法是一种环氧树脂包裹样品，需要热量聚合，并且由于加热而导致各种抗原性，因此被金螺旋体方法检测到。抗原类型的类型很少。接下来，使用Ro-Wikrill K4M的包裹样品，该样品是一种可以是低温聚合物的树脂，检测无法用环氧树脂包裹的抗原，并且是基于胆碱的突触蛋白之一垂体垂体VP -end -end -ends中存在Sinaptojin。此外，我们研究了对冷冻的超薄金蛋白酶方法的应用，该方法似乎是保留抗原的最佳方法，并确认可以检测到各种抗原。将来，使用螺栓粉状的碎片和冰冻的超薄片Ro-Wyclil K4M，这是一种多涂层的免疫染色方法，该方法是通过同时发生的，用于单个VP NU-RON的NU-RON将追求神经优势。

项目成果

Chikara Iwai: "Electron-microscopic immunocytochemistry of neuropeptide Y immunoreactive innervation of vasopressin neurons in the paraventricular nucleus of the rat hypothalamus." Acta Anat.136. 279-284 (1989)

Chikara Iwai：“大鼠下丘脑室旁核中加压素神经元神经肽 Y 免疫反应性神经支配的电子显微镜免疫细胞化学。”

落合英彦: "バゾプレッシンニュ-ロンのアドレナリン性神経支配についての免疫電顕的観察" 解剖学雑誌. 64. 415 (1989)

Hidehiko Ochiai：“加压素神经元肾上腺素神经支配的免疫电子显微镜观察”解剖学杂志 64. 415 (1989)。

中井康光: "脳ホルモンと神経伝達物質の相関ー電顕細胞化学的観察ー" ホルモンと臨床. 37. 811-818 (1989)

Yasumitsu Nakai：“脑激素和神经递质之间的相关性 - 电子显微镜细胞化学观察”激素和临床研究 37. 811-818 (1989)。

Takumi Abe: "Immunoelectron microscopy of neurons containing atrial natriuretic peptide and their innervation of neurons containing vasopressin in the hypothalamic paraventricular nucleus and median eminence of th rat." J.Clin.Electron Microscopy. 22. 189

Takumi Abe：“免疫电子显微镜观察大鼠下丘脑室旁核和正中隆起中含有心房钠尿肽的神经元及其对含有加压素的神经元的神经支配。”

中井康光: "ペプチドニュ-ロンの神経性制御機構 Neuronal Regulation Mechanism of Peptide Neurons" 日本臨床. 48. (1990)

Yasumitsu Nakai：“肽神经元的神经调节机制”日本诊所 48。（1990）