性ステロイド標的器官上皮細胞の培養系の確立

性类固醇靶器官上皮细胞培养体系的建立

基本信息

批准号：
01540619
负责人：
榎並淳平
金额：
$ 0.9万
依托单位：
Dokkyo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

前立腺上皮細胞の増殖および機能発現アンドロジェンの支配下にあることが知られており、このことは器官培養を用いることにより、in vitroにおいても観察されている。しかし、アンドロジェンが上皮細胞に直接に作用しているのかそれともまず間質細胞に作用し、その二次的効果が上皮細胞に現われるのかは依然として不明である。このことを明らかにするために、マウス前立腺上皮細胞を単離し、無血清条件下でコラ-ゲンゲル包埋培養を試みた。その結果、基本培地にEGFを添加することにより細胞増殖の促進が観察された。また、EGFと共に5d-DihydrtestosteroneまたはTestosteroneを添加すると細胞増殖はさらに顕著に促進された。これに対しEstradiol-17β、Progesterone、Deoxycorticosteroneは全く効果をもたなかった。Cortisolは細胞増殖を促進したが、アンドロジェンに比べ1000倍もの高濃度が必要であった。顕微鏡下の観察によると上皮細胞はコラ-ゲンゲル中で三次元的樹枝状形態形成あるいは腺腔形成を伴って増殖していくことがわかる。これらの細胞にはCytokeratinの存在が免疫学的に確認され、また、ゲル中には間質由来の線維芽細胞の混入もほとんど認められなかった。これらのことからアンドロジェンは前立腺上皮細胞に直接に作用し、細胞増殖を促進すると結論された。

已知前列腺上皮细胞增殖和功能表达受到雄激素的控制，并且在体外使用器官培养也观察到了这一点。然而，目前尚不清楚雄激素是直接作用于上皮细胞还是首先作用于基质细胞并对上皮细胞产生继发性影响。为了澄清这一点，分离小鼠前列腺上皮细胞并在无血清条件下在胶原凝胶中培养。结果，观察到通过向基础培养基中添加EGF促进了细胞增殖。此外，当5d-二氢睾酮或睾酮与EGF一起添加时，细胞增殖进一步显着促进。另一方面，Estradiol-17β、Progesterone 和 Deoxycorticosterone 则完全没有效果。皮质醇促进细胞增殖，但所需浓度比雄激素高1000倍。显微镜下观察，胶原凝胶中上皮细胞增殖，形成三维树突状形态或腺腔形成。免疫学证实这些细胞中存在细胞角蛋白，并且在凝胶中几乎没有观察到间质成纤维细胞。从这些发现得出结论，雄激素直接作用于前列腺上皮细胞并促进细胞增殖。