分化誘導による下垂体細胞機能調節機構

通过诱导分化调节垂体细胞功能

基本信息

批准号：
63560284
负责人：
塩田邦郎
金额：
$ 1.15万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63560284/
关键词：
アクチビン下垂体 FSH ホルモンパラクリンインヒビン

项目摘要

アクチビンはインヒビン単離精製の過程で卵胞刺激ホルモン(FSH)分泌を促進する因子として分離されたもので、インヒビンβサブユニットのホモダイマーより成る。申請者からは初代培養下垂体細胞を用いてアクチビンAの作用機構を研究してきた。まず、下垂体細胞をアクチビンで処置した場合、FSH分泌促進作用発現には比較的長時間を要すること、その際、アクチビンはFSH分泌期間中存在する必要は無く、前処理で効果が現われることが明らかになった。また、下垂体細胞を異なる細胞密度で培養し、アクチビンの作用を調べたところ、培養密度が低い程、アクチビンの効果の現われる時期が早くなることがわかった。以上よりアクチビンの作用は下垂体細胞の分化増殖と関係している可能性が考えられた。そこで抗FSH血清を用いた免疫染色法によりアクチビンのFSH細胞数に対する影響を調べた。その結果、アクチビン処理によって有意にFSH細胞数の増加がみられ、従ってアクチビンにはFSH細胞の増殖あるいは幹細胞からのFSH細胞への分化を促進している可能性が示された。これらの実験と併行してアクチビンのアミノ末端および活性部位のペプチドフラグメントを用いて抗原とし、抗アクチビン抗体を作製した。これら抗体を用いて下垂対を免疫染色したところ、アクチビンを含む細胞が下垂体中に存在することが判明した。さらに抗体を結合させたAHセファロースアフィニティーカラムを用いた下垂体からアクチビン抽出を試みたところ、分子量16,000、30,000、66,000の3種類の分子量の異ったタンパク質が存在することが明らかとなった。以上、アクチビンの作用機構を研究することにより、下垂体細胞の分化あるいは増殖を介したホルモン分泌調節系が存在すること、下垂体中にはアクチビン様タンパクが存在しパラクリン因子として作用している可能性が示唆された。

激活素被分离为促进抑制素分离和纯化过程中促进卵泡激素（FSH）分泌的因素，并由抑制素β亚基的同二聚体组成。申请人研究了使用原代培养垂体细胞的激活素A作用机理。首先，揭示了垂体细胞用激活素处理时，FSH分泌促进作用需要相对较长的时间，并且在FSH分泌期间不需要存在激活素，并且该作用在预处理中表现出来。此外，当在不同的细胞密度下培养垂体细胞并检查了激活素的作用时，发现培养密度越低，激活素的作用就越早。从以上，可以认为激活素的作用可能与垂体细胞的分化和增殖有关。因此，通过使用抗FSH血清进行免疫染色，研究了激活素对FSH细胞数量的影响。结果，由于激活素治疗，FSH细胞的数量显着增加，因此表明激活素可能促进FSH细胞的增殖或从干细胞分化为FSH细胞。结合这些实验，使用抗原使用氨基末端和活性位点的肽片段来产生抗原。当使用这些抗体来免疫染色术对，发现垂体中存在含有激活素的细胞。此外，当我们尝试使用抗体结合的AH Sepharose亲和力柱从垂体中提取激活素时，揭示了三种不同的分子量蛋白：16,000、30,000和66,000。对激活素机制的上述研究表明，通过垂体细胞的分化或增殖存在激素分泌系统，并且垂体中可能存在激活素样蛋白质，并充当旁花因子。