分化誘導による下垂体細胞機能調節機構

通过诱导分化调节垂体细胞功能

基本信息

批准号：
63560284
负责人：
塩田邦郎
金额：
$ 1.15万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63560284/
关键词：
アクチビン下垂体 FSH ホルモンパラクリンインヒビン

项目摘要

アクチビンはインヒビン単離精製の過程で卵胞刺激ホルモン(FSH)分泌を促進する因子として分離されたもので、インヒビンβサブユニットのホモダイマーより成る。申請者からは初代培養下垂体細胞を用いてアクチビンAの作用機構を研究してきた。まず、下垂体細胞をアクチビンで処置した場合、FSH分泌促進作用発現には比較的長時間を要すること、その際、アクチビンはFSH分泌期間中存在する必要は無く、前処理で効果が現われることが明らかになった。また、下垂体細胞を異なる細胞密度で培養し、アクチビンの作用を調べたところ、培養密度が低い程、アクチビンの効果の現われる時期が早くなることがわかった。以上よりアクチビンの作用は下垂体細胞の分化増殖と関係している可能性が考えられた。そこで抗FSH血清を用いた免疫染色法によりアクチビンのFSH細胞数に対する影響を調べた。その結果、アクチビン処理によって有意にFSH細胞数の増加がみられ、従ってアクチビンにはFSH細胞の増殖あるいは幹細胞からのFSH細胞への分化を促進している可能性が示された。これらの実験と併行してアクチビンのアミノ末端および活性部位のペプチドフラグメントを用いて抗原とし、抗アクチビン抗体を作製した。これら抗体を用いて下垂対を免疫染色したところ、アクチビンを含む細胞が下垂体中に存在することが判明した。さらに抗体を結合させたAHセファロースアフィニティーカラムを用いた下垂体からアクチビン抽出を試みたところ、分子量16,000、30,000、66,000の3種類の分子量の異ったタンパク質が存在することが明らかとなった。以上、アクチビンの作用機構を研究することにより、下垂体細胞の分化あるいは増殖を介したホルモン分泌調節系が存在すること、下垂体中にはアクチビン様タンパクが存在しパラクリン因子として作用している可能性が示唆された。

激活素被分离为促进卵泡激素（FSH）的分泌的因素，并在inindibin隔离过程中，由Inchibin beta子单元组成。申请人使用了第一代培养垂体细胞研究了激活素A的作用机理。首先，如果用激活素处理垂体细胞，则促进作用的FSH分泌相对较长，当时，在FSH分泌期内不需要存在，并且在预处理中可能会出现效果。另外，垂体细胞以不同的细胞密度培养，并检查了激活素的作用，培养素密度越低，即激活素效应出现的时间越快。从以上，激活素的作用可能与垂体细胞的分化和增殖有关。因此，使用抗-FSH血清通过免疫基团方法检查了激活素FSH细胞的作用。结果，激活素加工显着增加了FSH细胞的数量，因此，激活素可以促进FSH细胞的产生或从干细胞中分化为FSH细胞。与这些实验结合使用，使用抗原使用氨基末端和活性素的活性区域的肽片段，并创建抗活性蛋白抗体。当使用这些抗体染色时，发现垂体中存在含有活化素的细胞。此外，当使用Ah头壳亲和力柱的垂体结合了抗体时，揭示了三种不同的蛋白质，分子量为16,000、30,000和66,000。如上所述，通过研究激活素的作用机制，通过垂体细胞的分化或增殖存在激素分泌系统，并且垂体中有一个类似激活素的蛋白质，可以用作帕拉克林因素被建议。