先天異常線毛の免疫電子顕微鏡観察

先天性异常菌毛的免疫电镜观察

• 批准号: 61570160
• 负责人: 鳥潟 親雄
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61570160/
• 关键词: Kartagener症候群; Immotile-dyskinetic cilia症候群; 先天的線毛異常; 男性不妊; dynein arm; タンニン酸固定; 免疫電顕

Inomotile cilia症候群に代表される先天的線毛異常に関しては、臨床上の所見の他に、線毛運動の有無・超微形態上の異常所見等により診断されている。電顕上の所見として、dynein armの欠損の他にも種々の異常が見い出されている。我々はdynein armやprotofilamentの観察に有利なタシニン酸固定法を行い呼吸器線毛の観察を続けているが、機能面での解析のためには、免疫組織化学的な手技の導入が必要である。1.日本における先天的異常線毛症例1975年の最初の報告以来、欧米では多数の報告がなされている。80年に入り、日本人症例も見い出され、現在30数例の報告がある。我々も5例を見い出している。4例の小児科例(男1,女3,内1例のKartagener症候群)と1例の成人男子例で、精子の検索も行っている。主な異常所見は、dyneinarmの欠損であるが、男児例では、armがあり運動性もあるが、形態異常をcentral pairに見い出した新しい型と考えられるものもある。微小管を構成するprotofilsmentの数は、人の場合、13個であるが、極めて稀に17個のものも見い出され、nexin linkの欠損を思わせるものも、混在していた。2.免疫電子顕微鏡観察線毛を構成する微小管tubulinの免疫染色には、グルタール固定材料の切片上でのprotein A-goldによる反応で、かなりの成績を得ており、この方法で、α,B tubulinの配例,基底小体のtripletから線毛部のdoubletへの変換,bosalplateにおけるcentral pairの出現機序等に関し観察を続けている。DyneinやMAPS等の機能蛋白の局在観察のために、PLP固定による検討を行い、微細構造の保持に関して満足すべき結果を得ている。現在、固定材料に使用できる抗dynein抗体を入手不可であり、今後、これらの抗体作製にも努力する必要がある。

先天性纤毛异常，例如纤毛不动综合征，除了临床表现外，还根据纤毛运动是否存在和超微结构异常进行诊断。除了动力蛋白臂缺失之外，电子显微镜还发现了各种其他异常。我们继续使用他辛酸固定法观察呼吸纤毛，这有利于观察动力蛋白臂和原丝，但对于功能分析，有必要引入免疫组织化学技术。一、日本先天性伞毛异常病例 自1975年首次报道以来，欧美已有大量报道。 20世纪80年代，日本也发现了病例，目前已报告病例30多例。我们还发现了5例。我们还对 4 名儿童病例（1 名男性、3 名女性、1 名卡塔格纳综合征患者）和 1 名成年男性病例进行了精子检查。主要的异常发现是动力臂的丧失；在男孩的情况下，手臂存在并且能活动，但也有一个被认为是新类型的病例，其中在中央对中发现了形态异常。在人类中，组成微管的原丝数量为13个，但在极其罕见的情况下，发现了17个原丝，并且还存在nexin连接缺陷的情况。 2. 免疫电镜 对于构成菌毛的微管微管蛋白的免疫染色，在戊二酸固定材料的切片上与蛋白A-金反应已取得良好的结果，我们正在继续观察B微管蛋白的排列，即三联体的转化。菌毛中的基体到双联体，以及bosalplate 中中央对的出现机制。为了观察动力蛋白和MAPS等功能蛋白的定位，我们研究了PLP固定的使用，并在精细结构的维持方面获得了令人满意的结果。目前，还没有可用于固定材料的抗动力蛋白抗体，未来需要努力生产这些抗体。

项目成果

鳥潟親雄 著,影山圭三等編集: "「現代病理学大系 第二巻 細胞組織の基本病変 【I】,細胞の障害 3.細胞質の構造と病理」(9),中心小体,線毛,微小管,形質内フィラメント" 中山書店,

鸟形智考着，影山敬三编：《现代病理学第2卷细胞组织的基本病变[I]，细胞疾病3.细胞质的结构和病理学》（9），中心粒，菌毛，微管，胞浆内丝》中山书店,

鳥潟親雄: 病理と臨床.

Chikao Torigata：病理学和临床实践。

鳥潟親雄: 医学のあゆみ. )vol.140(11. 794 (1987)

Chikao Torigata：医学史）vol.140(11. 794 (1987)

鳥潟親雄: 病理と臨床 特集「細胞骨格」. (1987)

Chikao Torigata：病理学和临床专题“细胞骨架”（1987）。

鳥潟親雄: 呼吸.

鸟形智功：呼吸。