Reversible O-Phosphorylierung von Hydroxyprolin und Hydroxylysin in Proteinen

蛋白质中羟脯氨酸和羟赖氨酸的可逆 O-磷酸化

• 批准号: 5203434
• 负责人: Professor Dr. Ralf Hoffmann
• 金额: --
• 依托单位: Biotechnologisch-Biomedizinisches Zentrum (BBZ)
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1998-12-31 至 2001-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5203434?language=en
• 关键词: Reversible; Phosphorylierung; von; Hydroxyprolin; und

Der vorliegende Antrag hat das Ziel, bisher wenig untersuchte O-Phosphorylierungen an Hydroxy-L-prolin- und Hydroxy-L-lysinResten in Proteinen zu identifizieren sowie deren biochemische Bedeutung zu entschlüsseln. Dazu müssen zunächst grundlegende Methoden, insbesondere eine sensitive Analytik, entwickelt werden. Aufbauend auf unseren Vorarbeiten sollen die nötigen Aminosäurederivate synthetisiert und die Synthese der Phosphopeptide etabliert werden. Diese Phosphopeptide stellen dann die Grundlage für die Entwicklung einer umfassenden Proteinanalytik mittels Chromatographie, Gelelektrophorese, Aminosäureanalytik, Edman-Abbau, Massenspektrometrie und spezifischer Antikörper dar. Die sehr sensitive Massenspektrometrie verspricht die zentrale Methode zur Identifizierung phosphorylierter Hyp- und Hyl-Rese in Proteinen zu werden. Sobald in einem Protein ein Phospho-Hyp oder eine Phospho-Hyl identifiziert wird, kann mittels Sequenzanalyse die genaue Position bestimmt werden. An diesem Protein wird dann der Einfluß der Phosphorylierung auf die Struktur und die Funktion des Proteins untersucht. Ferner soll die beteiligte Kinase identifiziert werden. Besitzen die produzierten Antikörper eine ausreichend hohe Spezifität und Sensitivität, soll das Phosphorylierungsmuster des ausgewählten Proteins in verschiedenen Geweben und Organen untersucht werden.

在本文中，我们将在蛋白质鉴定中对 O-磷酸化、羟基-L-脯氨酸和羟基-L-赖氨酸进行重新鉴定，以了解生物化学的原理。敏感的分析，entwickelt werden。色谱法、凝胶电泳、氨基分析、Edman-Abbau、质谱分析和特殊分析。 Phospho-Hyp 或 Phospho-Hyl 识别线，可以通过序列分析来确定最佳位置。韦尔登。