ACE2のユビキチン化を介したコロナウイルス感染機構の解明と創薬への挑戦

通过ACE2泛素化阐明冠状病毒感染机制和药物发现的挑战

• 批准号: 22KJ2499
• 负责人: 岡元 拓海
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ2499/
• 关键词: COVID-19; SARS-CoV-2; ACE2; ユビキチン; エンドサイトーシス

SARS-CoV-2の細胞内への侵入には、SARSの原因ウイルスと同様にACE2に結合し、エンドサイトーシスにより取り込まれ、エンドソームのような酸性環境下で活性化することが必要である。しかし、ウイルス感染時におけるACE2のエンドサイトーシス制御の詳細は解明されていない。受容体などの膜タンパク質は、エンドサイトーシスによって活性や分解が制御されているが、その鍵となるのがユビキチン化であることから、本研究では、ウイルス感染時のACE2に対してユビキチン化を促進するE3と抑制するDUBを同定することで、SARS-CoV-2の感染機構を明らかにし、コロナウイルスに共通した作用機序の抗ウイルス薬の開発に挑戦する。そこで、ウイルス感染時のACE2に対するE3、DUBの同定のため、ビオチンリガーゼAPEX2を融合したACE2の発現細胞の樹立を行った。また、同定したE3やDUBを標的とした治療薬探索のためのスクリーニングを行うのに必要なスパイクタンパク質を十分量準備するため、スパイクタンパク質の精製法の検討を行った。

为了让 SARS-CoV-2 进入细胞，它必须与 ACE2 结合，被内吞作用吸收，并在酸性环境（如内体）中被激活，类似于引起 SARS 的病毒。然而，病毒感染期间 ACE2 内吞调节的细节尚未阐明。受体等膜蛋白的活性和降解是由内吞作用控制的，而其关键是泛素化，因此在本研究中，我们通过识别促进性E3和抑制性DUB来研究泛素化对病毒感染过程中ACE2的影响。将阐明SARS-CoV-2的感染机制，并迎接开发具有冠状病毒共同作用机制的抗病毒药物的挑战。因此，为了在病毒感染期间识别ACE2的E3和DUB，我们建立了表达与生物素连接酶APEX2融合的ACE2的细胞。此外，为了制备筛选针对已鉴定的E3和DUB的治疗药物所需的足够量的刺突蛋白，我们研究了纯化刺突蛋白的方法。

项目成果

SARS-CoV-2スパイクタンパク質が誘導するACE2のユビキチン化によるエンドサイトーシスと分解機構の解析

SARS-CoV-2刺突蛋白诱导ACE2泛素化的内吞和降解机制分析

• 发表时间: 2023
• 作者: 末長弘基;岡元拓海;金子雅幸
• 通讯作者: 金子雅幸

SARS-CoV-2受容体ACE2のユビキチン化によるエンドサイトーシスと分解機構の解析

SARS-CoV-2受体ACE2泛素化的内吞和降解机制分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 末長弘基;岡元拓海;金子雅幸
• 通讯作者: 金子雅幸

高浸透圧適応における腎臓特異的ユビキチンリガーゼRNF183の機能解析

肾脏特异性泛素连接酶RNF183在高渗透压适应中的功能分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 東優稀;岡元拓海;金子雅幸
• 通讯作者: 金子雅幸

腎臓特異的ユビキチンリガーゼRNF183によるイオントランスポーターNKCC1の分解機構

肾脏特异性泛素连接酶RNF183降解离子转运蛋白NKCC1的机制

• 发表时间: 2022
• 作者: 東優稀;岡元拓海;金子雅幸
• 通讯作者: 金子雅幸

腎臓特異的ユビキチンリガーゼRNF183の機能および疾患との関連性の解析

肾脏特异性泛素连接酶RNF183的功能分析及其与疾病的关系

• 发表时间: 2022
• 作者: 岡元拓海;金子雅幸
• 通讯作者: 金子雅幸