環境中での薬剤耐性菌の制御に向けた，原生生物のバイオフィルム捕食作用の評価

原生生物生物膜捕食控制环境耐药菌效果评价

• 批准号: 22K12404
• 负责人: 小林 由紀
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K12404/
• 关键词: 薬剤耐性菌; 原生生物; ESBL産生菌; Paramecium; ゾウリムシ; 捕食; バイオフィルム; ワンヘルス

【背景・目的】薬剤耐性菌は世界的に重要視されている公衆衛生上の問題の一つである. 薬剤耐性菌を減らす方法として，本研究では,環境に負荷を与えない 微生物ループの視点から，細菌の捕食者である原生生物を用いた捕食による薬剤耐性菌除去に着目した.【方法】2種の繊毛虫 (Paramecium caudatum dCRT14b, Paramecium multimicronucleatum Y-2) と3種のESBL産生菌を用いて, ESBL産生菌に対する繊毛虫の捕食能力, 消化能力を評価した. さらに, 温度が捕食能力, 消化能力に影響を与えるか検証した.【結果】2種のParameciumの捕食率は, 24時間後に全ての菌で90%を超えており, 捕食効果を確認した. Parameciumの食胞内での消化を評価するため, 2種のParameciumのGFP含有食胞のLysoTracker陽性率を比較した結果, 2種ともに消化が確認され, 陽性率はP. multimicronucleatum Y-2のほうがP. caudatum dCRT14bよりも高値を示した. Parameciumから排出された薬剤耐性遺伝子を検出するため, 細胞外DNAをリアルタイムPCRで解析した結果, 薬剤耐性遺伝子CTX-M-15の相対値は, P. multimicronucleatum Y-2では非存在群に比べて有意な減少を認めた. しかし, P. caudatum dCRT14bでは, 培養1日目の存在群において, 非存在群に比べ相対値が増加していた.【考察】2種のParameciumはESBL産生菌を捕食消化することを明らかにした. さらに, P. multimicronucleatum Y-2は薬剤耐性菌だけでなく, 薬剤耐性遺伝子まで効率よく消化することも示された.

[背景/目的] 耐药菌是全球重要的公共卫生问题之一。作为减少耐药菌的一种方法，本研究重点关注不给环境造成负担的微生物循环视角。因此，我们重点通过利用细菌捕食者原生生物来消灭耐药细菌。 [方法]两种纤毛虫（尾草履虫 dCRT14b、多微核草履虫 Y-2）。我们利用以下三种产ESBL细菌评估了纤毛虫对产ESBL细菌的捕食和消化能力。并验证了温度是否影响纤毛虫的捕食和消化能力。[结果]草履虫的捕食率超过90 24小时后所有细菌的百分比，证实了捕食效果。为了评估食物泡内草履虫的消化，比较两种草履虫的含有 GFP 的食物液泡的 LysoTracker 阳性率，结果证实两种草履虫均被消化，且 P. multimicronucleatum Y-2 的阳性率高于 P. caudatum dCRT14b。检测分泌的耐药基因，实时荧光定量PCR分析细胞外DNA，发现耐药基因CTX-M-15的相对值为P。对于multimicronucleatum Y-2，与缺失组相比，观察到显着降低，然而，对于P. caudatum dCRT14b，与缺失组相比，在培养第一天，当前组的相对值增加。研究表明，两种草履虫捕食并消化产生 ESBL 的细菌，此外，P. multimicronucleatum Y-2 不仅能有效消化耐药细菌，还能有效消化耐药基因。

项目成果

Antimicrobial resistant bacteria in the aquatic environments

水生环境中的抗菌药物耐药细菌

• 发表时间: 2022
• 作者: Yuki Kobayashi;Jun Nishikawa;Soichiro Fukuda;Yumi Okabe;Tomohiro Fujii;Naoto Kubota;Yuka Tanaka;Mio Tsurui;Ken-Ichiro Otsuyama;Hidehiro Tsuneoka;Yuki Kobayashi
• 通讯作者: Yuki Kobayashi

The bactericidal effect of far-UVC on ESBL-producing Escherichia coli

远紫外线对产ESBL大肠杆菌的杀菌作用

• 发表时间: 2022
• 作者: Yuki Kobayashi;Jun Nishikawa;Soichiro Fukuda;Yumi Okabe;Tomohiro Fujii;Naoto Kubota;Yuka Tanaka;Mio Tsurui;Ken-Ichiro Otsuyama;Hidehiro Tsuneoka
• 通讯作者: Hidehiro Tsuneoka

Evaluation of predation by protists Paramecium on antimicrobial resistant bacteria

原生生物草履虫对抗菌药物耐药菌的捕食评价

• 发表时间: 2023
• 作者: Yuka Tanaka;Mio Tsurui; Yuki Kobayashi;Kenta Watanabe;Masahisa Watarai
• 通讯作者: Masahisa Watarai