環境中での薬剤耐性菌の制御に向けた，原生生物のバイオフィルム捕食作用の評価

原生生物生物膜捕食控制环境耐药菌效果评价

• 批准号: 22K12404
• 负责人: 小林 由紀
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K12404/
• 关键词: 薬剤耐性菌; 原生生物; ESBL産生菌; Paramecium; ゾウリムシ; 捕食; バイオフィルム; ワンヘルス

【背景・目的】薬剤耐性菌は世界的に重要視されている公衆衛生上の問題の一つである. 薬剤耐性菌を減らす方法として，本研究では,環境に負荷を与えない 微生物ループの視点から，細菌の捕食者である原生生物を用いた捕食による薬剤耐性菌除去に着目した.【方法】2種の繊毛虫 (Paramecium caudatum dCRT14b, Paramecium multimicronucleatum Y-2) と3種のESBL産生菌を用いて, ESBL産生菌に対する繊毛虫の捕食能力, 消化能力を評価した. さらに, 温度が捕食能力, 消化能力に影響を与えるか検証した.【結果】2種のParameciumの捕食率は, 24時間後に全ての菌で90%を超えており, 捕食効果を確認した. Parameciumの食胞内での消化を評価するため, 2種のParameciumのGFP含有食胞のLysoTracker陽性率を比較した結果, 2種ともに消化が確認され, 陽性率はP. multimicronucleatum Y-2のほうがP. caudatum dCRT14bよりも高値を示した. Parameciumから排出された薬剤耐性遺伝子を検出するため, 細胞外DNAをリアルタイムPCRで解析した結果, 薬剤耐性遺伝子CTX-M-15の相対値は, P. multimicronucleatum Y-2では非存在群に比べて有意な減少を認めた. しかし, P. caudatum dCRT14bでは, 培養1日目の存在群において, 非存在群に比べ相対値が増加していた.【考察】2種のParameciumはESBL産生菌を捕食消化することを明らかにした. さらに, P. multimicronucleatum Y-2は薬剤耐性菌だけでなく, 薬剤耐性遺伝子まで効率よく消化することも示された.

[背景和目的]耐药细菌是在全球范围内被视为重要的公共卫生问题之一。这项研究的重点是从微生物环的角度使用生物（一种细菌捕食者）来消除抗药性细菌，而细菌捕食者不会给环境带来负担。 [方法]两种类型的纤毛（carudatum dcrt14b，Pramecium多核核Y-2）和三种类型的ESBL产生细菌用于评估纤毛对ESBL产生细菌的掠食性和消化能力。此外，还验证了温度是否影响掠食性和消化能力。 [结果]在24小时后，所有细菌的两种类型的映射的捕食率均超过90％，并证实了掠食作用。为了评估吞噬细胞内pragium的消化，我们比较了两种Pramecium种的含GFP的含GFP的吞噬细胞的lysotracker阳性速率，并且在两种物种中都证实了消化，并且在P. capudatum y-2的阳性率中比白念珠菌y-2高。为了检测从甲苯丙烷排出的耐药性基因，我们通过实时PCR分析了细胞外DNA，发现与不存在的组相比，在多米核酸杆菌Y-2中，耐药性基因CTX-M-15的相对值显着降低。然而，在Caudatum dcrt14b中，观察到培养的第一天的存在组。与不存在的组相比，相对值增加。 [讨论]揭示了产生ESBL的细菌的两种种类的抗逆掠食性消化。此外，已经表明，多核核核蛋白核Y-2不仅消化了耐药细菌，还可以有效地消化耐药基因。

项目成果

Antimicrobial resistant bacteria in the aquatic environments

水生环境中的抗菌药物耐药细菌

• 发表时间: 2022
• 作者: Yuki Kobayashi;Jun Nishikawa;Soichiro Fukuda;Yumi Okabe;Tomohiro Fujii;Naoto Kubota;Yuka Tanaka;Mio Tsurui;Ken-Ichiro Otsuyama;Hidehiro Tsuneoka;Yuki Kobayashi
• 通讯作者: Yuki Kobayashi

The bactericidal effect of far-UVC on ESBL-producing Escherichia coli

远紫外线对产ESBL大肠杆菌的杀菌作用

• 发表时间: 2022
• 作者: Yuki Kobayashi;Jun Nishikawa;Soichiro Fukuda;Yumi Okabe;Tomohiro Fujii;Naoto Kubota;Yuka Tanaka;Mio Tsurui;Ken-Ichiro Otsuyama;Hidehiro Tsuneoka
• 通讯作者: Hidehiro Tsuneoka

Evaluation of predation by protists Paramecium on antimicrobial resistant bacteria

原生生物草履虫对抗菌药物耐药菌的捕食评价

• 发表时间: 2023
• 作者: Yuka Tanaka;Mio Tsurui; Yuki Kobayashi;Kenta Watanabe;Masahisa Watarai
• 通讯作者: Masahisa Watarai