新規腎疾患診断法の開発：糸球体上皮細胞傷害機序の解明と尿中バイオマーカーへの応用

开发一种新的肾脏疾病诊断方法：阐明肾小球上皮细胞损伤机制及其在尿液生物标志物中的应用

基本信息

批准号：
13J00961
负责人：
木村純平
金额：
$ 2.53万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、慢性腎臓病（CKD）の主因となる慢性糸球体腎炎におけるポドサイトの傷害メカニズムを解明し、傷害マーカーの同定・尿中検出法の確立によって、「CKDの早期診断法の開発および有効な新規治療法につながるシーズを提供する」ことを目的としている。これまでの研究により、①慢性糸球体腎炎におけるポドサイト傷害の分子形態学的変化、②自己免疫疾患、およびそれに続発する慢性糸球体腎炎の病態における、第一染色体テロメア領域に存在する遺伝子座の関与、③CKD、特に慢性糸球体腎炎におけるポドサイト細胞傷害へのTLR8シグナル活性化の関与、④イヌの腎臓における糸球体、特にポドサイト特異的なTLR8の発現と、糸球体傷害時における発現増加を明らかとしてきた。本年度は、新たなポドサイト傷害仮説としての「インフラマソームとポドサイト傷害との関連」について解析を行った。慢性糸球体腎炎モデルマウス（BXSB/MpJ-Yaaマウス）の分離糸球体において、インフラマソーム関連因子は高発現を示し、ウエスタンブロットによる蛋白発現解析の結果、これらが活性化していることが明らかとなった。また、これらの因子の糸球体内mRNA発現量はポドサイト傷害スコアと強い正の相関を示し、その蛋白局在はポドサイト領域に限局した。これらの結果から、慢性糸球体腎炎において、インフラマソームの活性化がポドサイトの病理学的プロセスに関与する可能性が示唆された。これらの成果は、「CKDの制御」という本研究の最終目標につながりうる新知見であり、ポドサイトをターゲットとした創薬研究に向けた重要なアカデミックエビデンスとなる。

本研究旨在阐明慢性肾病（CKD）的主要原因慢性肾小球肾炎足细胞损伤的机制，鉴定损伤标志物并建立尿液检测方法，从而开发早期诊断CKD的有效方法。提供新疗法的种子。迄今为止的研究表明，（1）慢性肾小球肾炎足细胞损伤的分子形态变化，以及（2）自身免疫性疾病及其继发的慢性肾小球肾炎的病理中存在于1号染色体端粒区域的遗传位点的参与，③C。我们阐明了TLR8信号激活与KD尤其是慢性肾小球肾炎的足细胞细胞损伤有关，以及(4)肾小球特异性、尤其是足细胞特异性TLR8在狗肾脏中的表达，及其在肾小球损伤期间表达增加。今年，我们分析了“炎症小体与足细胞损伤之间的关系”作为新的足细胞损伤假说。慢性肾小球肾炎模型小鼠（BXSB/MpJ-Yaa小鼠）的分离肾小球中炎症小体相关因子高表达，通过蛋白质印迹分析表明这些因子被激活。此外，这些因子的肾小球内mRNA表达水平与足细胞损伤评分呈强正相关，且蛋白定位仅限于足细胞区域。这些结果表明炎症小体激活可能参与慢性肾小球肾炎足细胞的病理过程。这些结果是可能导致本研究最终目标“控制CKD”的新发现，并将作为针对足细胞的药物发现研究的重要学术证据。